細(xì)胞培養(yǎng)操作：
1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
商品屬性：
產(chǎn)品名稱
英文名稱
LCLC-97TM1
產(chǎn)品貨號
AXB6405
培養(yǎng)條件
RPMI 1640 +20%
fetal bovine serum (FBS)+1%P/S37 ℃,
5% CO2
生長特性
貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
90% FBS + 10% DMSO
組織來源
肺
用途
僅供科研研究實驗
種屬來源；人
組織來源；肺
性別年齡；男性，44歲
生長特性；貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞規(guī)格；1 X 106cells/T25或1 mL凍存管
培養(yǎng)條件；RPMI 1640 +20% fetal bovine
serum (FBS)+1%P/S37 ℃, 5% CO2
凍存條件；90% FBS + 10% DMSO
傳代方法；1:3-1:5傳代, 2-3天傳1代
公司正在出售的產(chǎn)品：
錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 ANKS3
組織IKKβ激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） 人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)elisa分析檢測試劑盒
早期胎盤胰島素樣肽INSL4抗體 INSL4
26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型抗體 PSMC1
泛素蛋白連接酶M抗體 Anti-UBE2M 外周蛋白2抗體 Anti-PRPH2
大鼠環(huán)加氧酶1(COX-1)elisa分析檢測試劑盒 土壤銨態(tài)氮測試盒
CDK5激活結(jié)合蛋白1抗體 CDK5RAP1
胰腺特異轉(zhuǎn)錄因子PTF1A抗體 Anti-PTF1A Smad蛋白E3泛素連接酶2抗體 Anti-SMURF2鋅指蛋白ZBTB38抗體 ZBTB38
甲基化樣蛋白2B抗體 METTL2B 間隙連接蛋白30/GJB6抗體 connexin 30
APC標(biāo)記的驢抗人IgG H&L Donkey Anti-Human IgG H&L / APC
牛胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)elisa分析檢測試劑盒 IGFBP-1 ELISA Kit
小鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)elisa分析檢測試劑盒 ALP-BELISAKit
倉鼠脂氧素A4(LXA4)elisa分析檢測試劑盒 LXA4 ELISA Kit
LCLC-97TM1人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞人對氧磷酶(PON)elisa分析檢測試劑盒 PONELISAKit
5色氨酸羥化酶2抗體 TPH2 9號染色體開放閱讀框5抗體 C9orf5
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存。