細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	MAEC	英文名稱	MAEC
產(chǎn)品貨號	AXB9849	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長特性	貼壁生長	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	小鼠	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
組織來源	主動脈	用途	僅供科研研究實驗

細(xì)胞別稱；MAEC；小鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞

種屬來源；小鼠

組織來源；主動脈

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

細(xì)胞規(guī)格；1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測；無

培養(yǎng)基；M199+5% FBS+1%PS

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白49抗體       CCDC49

Toll樣受體11抗體  Anti-TLR11       G蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y11抗體  Anti-P2Y11

磷酸化內(nèi)收蛋白gamma抗體       phospho-gamma Adducin (Ser693)

APC標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG H&L       Rabbit Anti-Guinea Pig IgG H&L / APC

鋅指蛋白307抗體  Anti-ZNF307       親核素β1抗體  Anti-NTF97/KPNB1

蛋白酶體PSMα5抗體  Anti-Proteasome 20S alpha 5       硒結(jié)合蛋白1抗體  Anti-SBP1/Selenium Binding Protein 1

胰腺彈性蛋白酶3A抗體      Elastase 3A

環(huán)指蛋白1抗體  Anti-RING1       上皮鈉離子通道蛋白D/δENaC抗體  Anti-SCNN1D人附睪蛋白4(HE4)elisa分析檢測試劑盒       HumanHE4ELISAkit

BXDC1蛋白抗體       BXDC1

大鼠17-羥孕烯醇酮elisa分析檢測試劑盒       Rat 17-Hydroxypregnenolone ELISA Kit

人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)elisa分析檢測試劑盒       細(xì)胞溶酶體脂酶（酸性脂酶）活性比色法定量檢測試劑盒

小鼠血小板激活因子(PAF)elisa檢測試劑盒       大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)elisa檢測試劑盒免費代測

黑色素瘤相關(guān)抗原P97抗體       MFI2/MAP97

MAEC1號染色體開放閱讀框174抗體       C1orf174

轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白4抗體       LTBP4

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存。