
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
MB49:MB49
產(chǎn)品貨號(hào)
A01X1072
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。
生長(zhǎng)特性
貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)
產(chǎn)品種屬
小鼠
凍存條件
詳見(jiàn)說(shuō)明
組織來(lái)源
見(jiàn)說(shuō)明
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞數(shù)量:1*10^6
細(xì)胞運(yùn)輸:干冰運(yùn)輸(2ml凍存管)或活細(xì)胞運(yùn)輸(T25瓶)
培養(yǎng)基:準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基;胎牛血清10%,P/S青霉su-鏈霉su1%。
培養(yǎng)條件:培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。細(xì)胞凍存:液氮凍存(90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配)

細(xì)胞培養(yǎng)操作:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:

(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過(guò)度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:

肽基脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶FKBP11抗體 FKBP11
端粒酶調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白抗體 Anti-TRAP/Tartrate Resistant Acid Phosphatase P21蛋白激活的蛋白激酶6抗體 Anti-PAK6
NAALADL2蛋白抗體 NAALADL2
雌受體α抗體 Estro receptor alpha
SLAMF7抗體 Anti-SLAMF7/CD319/CS1 腫瘤抑制基因抗體 Anti-Nm23-H2
磷酸化Nemo樣激酶抗體 Anti-Phospho-Nemo-like kinase (Thr298) 視黃酸激活基因8抗體 Anti-Stra8
肉豆蔻?;D(zhuǎn)移酶2-N端肽抗體 NMT2
癌基因RAS相關(guān)蛋白Rab25抗體 Anti-Rab25 破傷風(fēng)重鏈抗體 Anti-Tetanus Toxin heavy chain人結(jié)蛋白(DES)抗體elisa分析檢測(cè)試劑盒 Humananti-desmin(DES)antibodyELISAkit
粘合連接相關(guān)蛋白1抗體 AJAP1
大鼠催產(chǎn)素(OT)elisa分析檢測(cè)試劑盒 OT ELISA Kit
琥珀酸脫氫酶(SDH)測(cè)試盒 小鼠α羥基丁酸脫氫酶(αHBDH)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠硬骨素(SOST)elisa檢測(cè)試劑盒 INSULIN R-ALPHA 蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白14抗體 KCTD14
MB49小鼠膀胱癌細(xì)胞肽/天蠶肽抗體 Cecropin-A
干擾素alpha 14蛋白抗體 IFNA14