細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)步驟：

?一、細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備?：
?生物柜的使用?：確保所有接觸細(xì)胞的物品都在生物柜中通過(guò)紫外，防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?：提供細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境，保持恒定的溫度（通常為37℃）?。
?培養(yǎng)基和血清?：特制的培養(yǎng)基包含各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如糖、氨基酸和維生素，添加胎牛血清和雙抗以提供生長(zhǎng)因子和防止污染?。
?二、細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程?：
?細(xì)胞接收與記錄?：記錄細(xì)胞系的相關(guān)信息，包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細(xì)胞形態(tài)觀察?：定期檢查細(xì)胞的形態(tài)和行為，確保細(xì)胞狀態(tài)健康，無(wú)污染?。
?細(xì)胞傳代?：當(dāng)細(xì)胞密度超過(guò)80%時(shí)進(jìn)行傳代，注意消化時(shí)間和條件，避免細(xì)胞損傷?。
三、?細(xì)胞系鑒定與維護(hù)?：
?細(xì)胞系鑒定?：通過(guò)STR圖譜確定細(xì)胞的遺傳特征，防止細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染?。
?細(xì)胞保存與管理?：定期進(jìn)行細(xì)胞冷凍保存，確保細(xì)胞的長(zhǎng)期存活和可用性?。

本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。

商品屬性：

產(chǎn)品貨號(hào)	A01X850	凍存條件	無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
產(chǎn)品分類	人細(xì)胞系	產(chǎn)品種屬	人
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
英文名稱	MET-5A:MET5A	組織來(lái)源	皮膚

商品介紹：

細(xì)胞別稱：MET-5A；人膜間皮細(xì)胞

種屬來(lái)源：人

年齡性別：

組織來(lái)源：皮膚

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

背景簡(jiǎn)介：

生物等級(jí)：2

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)：無(wú)

基因表達(dá)情況：

保藏機(jī)構(gòu)：

培養(yǎng)基：M199+10%FBS+3.3nM EGF +400 nM hydrocortisone +870nM Insulin

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

倍增時(shí)間：

STR鑒定位點(diǎn)Amelogenin：X,Y；CSF1PO：10,12；D2S1338：18,19；D3S1358：17,18；D5S818：12；D7S820：10；D8S1179：12,13；D13S317：11,13；D16S539：12；D18S51：15,23；D19S433：15；D21S11：31.2；FGA：22,23；PentaD：10,11；PentaE：10,16；TH01：6,9.3；TPOX：8；vWA：15,18；D6S1043：20；D12S391：19,24；D2S441：10,11.3；

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培養(yǎng)注意事項(xiàng) ：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。 
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。 
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。 
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。 
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。 
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。 
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。 
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后次傳代建議 1：2 傳代 。 
9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。