細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	MM.1R人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞	英文名稱	MM1.r
產(chǎn)品貨號	A01X859	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長特性	懸浮和輕微的貼壁同時存在	細(xì)胞形態(tài)	成瘤細(xì)胞
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
組織來源	外周血	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞別稱；MM1.r; MM.1R; MM1-R; MM-1R; MM1R; MM1.R(L); MM1.RL

種屬來源；人

年齡性別；女性

組織來源；外周血

生長特性；懸浮和輕微的貼壁同時存在

細(xì)胞形態(tài)；成瘤細(xì)胞

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景簡介；該細(xì)胞系的母細(xì)胞株MM.1是從一位對類固醇療法產(chǎn)生抗藥性的多發(fā)性骨髓瘤患者的外周血中建立的。MM.1R對地塞米松耐藥。近緣細(xì)胞系MM.1S也是從MM.1中分離出來的，但對地塞米松敏感。該細(xì)胞復(fù)蘇后需要兩周左右才能恢復(fù)正常生長。

STR位點(diǎn)；Amelogenin：X;CSF1PO：9,14;D1S1656：11,12;D2S441：11;D2S1338：21,22;D3S1358：16,17;D5S818：8,12;D7S820：10,11;D8S1179：14;D10S1248：12,15;D12S391：17,24;D13S317：13;D16S539：12;D18S51：11,16;D19S433：13;D21S11：29,30;D22S1045：10,11;FGA：20,24;Penta D：2.2,9;Penta E：13,15;TH01：7,8;TPOX：8;vWA：15,17

細(xì)胞規(guī)格；1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測；無

培養(yǎng)基；1640+10%FBS+PS

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存

Rabbit Anti-Human IgA / PE-Cy3       長鏈脂肪酸延長酶ELOVL4抗體

紅細(xì)胞磷脂酰肌醇聚糖A抗體       PIGA

抑基因SSDP2抗體  Anti-SSBP2       PE-Cy3標(biāo)記的兔抗人IgA

血栓素A2受體抗體  Anti-TXA2R       蛋白酶體PSMα2抗體  Anti-Proteasome 20S alpha 2

鋅指脂蛋白217抗體  Anti-ZNF217       谷氨酸受體NMDAζ1抗體  Anti-NMDA epsilon 1

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體       CCDC6

胞粘蛋白1抗體抗體  Anti-Cytohesin 1/PSCD1      ELOVL4

環(huán)指蛋白11抗體  Anti-RNF11       互養(yǎng)蛋白2抗體  Anti-Syntrophin-2人分泌型磷脂酶A2(sPLA2)elisa生化檢測試劑盒       sPLA2ELISAKit

磷酸化谷氨酸受體1抗體  Anti-Phospho-NMDAR1(Ser897)       血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體  Anti-VEGFR2/FLK1

大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)elisa生化檢測試劑盒       3-βD glucosidase ELISA Kit

甘氨酸含量測試盒       正常大鼠（Sprague Dawley）肝組織微粒體組分（5 毫克/毫升）

糖原含量測試盒       大鼠維生素D2(VD2)elisa檢測試劑盒

MGEA5抗體       MGEA5

MM.1R人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞1號染色體開放閱讀框183抗體       C1orf183

轉(zhuǎn)錄因子相互作用蛋白1抗體  Anti-TTI1       c-Myc應(yīng)答蛋白抗體  Anti-RCL/c Myc responsive

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存。