細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	NCI-H1944人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞	英文名稱	GB1：GB-1
產(chǎn)品貨號	AXB7157	培養(yǎng)條件
生長特性	貼壁生長	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	詳見說明
組織來源	分離自轉(zhuǎn)移灶：軟組織	用途	僅供科研研究實驗

細(xì)胞介紹

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞，來源軟組織轉(zhuǎn)移灶?；颊呓邮芰嗽缙诜派?，是一位吸煙者。

細(xì)胞特性

1） 來源：女 肺；分離自轉(zhuǎn)移灶：軟組織

2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 貼壁生長

3） 含量：>1x10^6 細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5）用途：僅供科研使用。

PHKG1       卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體

異檸檬酸脫氫酶gamma亞基抗體       IDH3G

脲酶 EC3.5.1.5 10KU/瓶       磷酸化酶激酶γ1

小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)elisa檢測試劑盒       谷氨酸（Glu）含量測試盒

腫瘤蛋白D54蛋白抗體  Anti-TPD54/TPD52L2       嘌呤受體P2X7抗體  Anti-P2RX7

白血病相關(guān)蛋白AHI1抗體       AHI1

石蠟切片組織IL蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒      CCDC37

原鈣粘蛋白介導(dǎo)的PCDHαC2受體抗體  Anti-PCDHAC2       絲氨酸合并蛋白3抗體（腫瘤差異表達(dá)蛋白）  Anti-SERINC3TRAF4相關(guān)因子1抗體       TRAF4AF1

小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)elisa檢測試劑盒       大鼠谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)elisa檢測試劑盒

Cy5標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG H&L       Donkey Anti-Guinea Pig IgG H&L / Cy5

人1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)elisa生化檢測試劑盒       -trisphosphate(IP3)ELISA kit

小鼠甲狀腺素(T4)elisa生化檢測試劑盒       T4ELISAKit

大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)elisa生化檢測試劑盒       PⅠCP ELISA Kit

NCI-H1944人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞人鈣蛋白酶2(M/II)大亞基(CAPN2)(CAPN2)elisa生化檢測試劑盒       HumanCAPN2ELISAkit

人白介素16(IL-16)elisa檢測試劑盒免費代測       體液基質(zhì)金屬（MMP）總活性熒光定量檢測試劑盒

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存。