
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
NCI-H1975:NCIH1975
產(chǎn)品貨號
A01X879
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
生長特性
貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來源
器官:肺;:腺癌;非小細(xì)胞肺癌
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
生長培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
背景描述 NCI-H1975細(xì)胞是于1988年7月從一名女性(無抽煙史)非小細(xì)胞肺腺癌組織中分離得到的。
年齡(性別) 女
組織來源 器官:肺;:腺癌;非小細(xì)胞肺癌
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 肺癌細(xì)胞
生物等級 1
倍增時間 ~28-45 hours
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-5908

細(xì)胞培養(yǎng)操作:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:

(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:

RBM38 組蛋白H3樣抗體
JM4蛋白抗體 JM4
動物細(xì)胞P型ATP酶(P type ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒 RNA結(jié)合蛋白38抗體
大鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)elisa檢測試劑盒 小鼠脫氧吡啶酚(DPD)elisa檢測試劑盒
ATP-依賴的RNA解旋酶p47抗體 Anti-UAP56/BAT1 原鈣粘蛋白γA4抗體 Anti-PCDHGA4
載脂蛋白L4抗體 APOL4
人β,β胡蘿卜素9',10'加氧酶(BCO2)elisa生化檢測試劑盒 Centromeric histone H3-like protein-2
鈣粘蛋白相關(guān)神經(jīng)受體8抗體 Anti-PCDHA10/CNRN8 二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶2抗體 Anti-UGCGL2鋅指同源盒蛋白4抗體 ZFHX4
大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)elisa檢測試劑盒 全組織衰老特異性脂褐素靛酚原位染色試劑盒
Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgG H&L Goat Anti-Mouse IgG H&L / Cy7
牛生長釋放多肽(GHRP)elisa生化檢測試劑盒 GHRP ELISA Kit
小鼠肺炎支原體(MP)抗體(IgG)elisa生化檢測試劑盒 Mousemycoplasmapneumoniae(MP)antibody(IgG)ELISAkit
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)elisa生化檢測試劑盒 IGFBP-3 ELISA kit
NCI-H1975人肺腺癌細(xì)胞人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)elisa生化檢測試劑盒 PDIELISAKit
藍(lán)藻果聚糖酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒 兔白介素8elisa檢測試劑盒