細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)步驟：

?一、細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備?：
?生物柜的使用?：確保所有接觸細(xì)胞的物品都在生物柜中通過紫外，防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?：提供細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境，保持恒定的溫度（通常為37℃）?。
?培養(yǎng)基和血清?：特制的培養(yǎng)基包含各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如糖、氨基酸和維生素，添加胎牛血清和雙抗以提供生長(zhǎng)因子和防止污染?。
?二、細(xì)胞培養(yǎng)過程?：
?細(xì)胞接收與記錄?：記錄細(xì)胞系的相關(guān)信息，包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細(xì)胞形態(tài)觀察?：定期檢查細(xì)胞的形態(tài)和行為，確保細(xì)胞狀態(tài)健康，無(wú)污染?。
?細(xì)胞傳代?：當(dāng)細(xì)胞密度超過80%時(shí)進(jìn)行傳代，注意消化時(shí)間和條件，避免細(xì)胞損傷?。
三、?細(xì)胞系鑒定與維護(hù)?：
?細(xì)胞系鑒定?：通過STR圖譜確定細(xì)胞的遺傳特征，防止細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染?。
?細(xì)胞保存與管理?：定期進(jìn)行細(xì)胞冷凍保存，確保細(xì)胞的長(zhǎng)期存活和可用性?。

本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。

商品屬性：

產(chǎn)品貨號(hào)	A01X896	凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
產(chǎn)品分類	人細(xì)胞系	產(chǎn)品種屬	人
生長(zhǎng)特性	半貼半懸	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞，懸浮并部分聚團(tuán)生長(zhǎng)
英文名稱	NCI-H716:NCIH716	組織來(lái)源	器官：盲腸；：結(jié)直腸腺癌

商品介紹：

生長(zhǎng)特性 半貼半懸

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞，懸浮并部分聚團(tuán)生長(zhǎng)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)方案A（默認(rèn)）

生長(zhǎng)培養(yǎng)基:

RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)條件:

氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2-3次/周

參考資料(來(lái)源文獻(xiàn))

背景描述 NCI-H716 [H716]細(xì)胞是從一位經(jīng)5-氟尿嘧啶的患者腹水中得到的細(xì)胞建立的細(xì)胞株。NCI-H716 [H716]細(xì)胞與其它結(jié)直腸癌細(xì)胞系不同，它有多巴脫羧酶，細(xì)胞質(zhì)中有核心致密的型顆粒。NCI-H716 [H716]細(xì)胞不表達(dá)TAG-72或CA19-9抗原，也不**癌胚抗原(CEA)。

年齡（性別） 男性；33歲

組織來(lái)源 器官：盲腸；：結(jié)直腸腺癌

細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型 腸癌細(xì)胞

生物等級(jí) BSL-1

倍增時(shí)間 ~50 hours

致瘤性 Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CCL-251

?公司正在出售的產(chǎn)品：

phospho-RAD51 (Tyr315)       細(xì)胞核受體ERBA相關(guān)基因2抗體

泛素結(jié)合酶E2F抗體       NCE2

泛素連接酶Siah2  Anti-SIAH2       磷酸化Rad51抗體

四分子交聯(lián)體13抗體（四旋蛋白）  Anti-TSPAN13/NET-6       原鈣粘附蛋白α2抗體  Anti-PCDHA2

神經(jīng)調(diào)節(jié)肽VGF抗體  Anti-VGF/NERP1       新型核蛋白質(zhì)1抗體  Anti-NNP1/RRP1 like protein

FOXI2蛋白抗體       FOXI2

氧化固醇結(jié)合蛋白4抗體  Anti-ORP4/OSBP2      NR2F6

環(huán)指蛋白113A抗體  Anti-RNF113A       轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β5抗體  Anti-TGF beta 5/ TGF beta 1人甲狀旁腺1-34(PTH 1-34)抗體elisa生化檢測(cè)試劑盒       HumanPTH1-34antibodyELISAKit

冰凍切片組織鈣鈉交換體（NCX）蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒       犬elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)elisa生化檢測(cè)試劑盒       hs-CRP ELISA Kit

大鼠神經(jīng)顆粒素(NG/NRGN)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)       熒光核酸凝膠染色試劑Gel Green10000x 500μl

人丁型肝炎IgG(HDV IgG)elisa檢測(cè)試劑盒       通用型HCV亞型（HEPATITIS VIRUS C）病毒定量PCR擴(kuò)增

KIAA1731蛋白抗體       KIAA1731

NCI-H716人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞趨化因子受體D6抗體       Chemokine Receptor D6

小鼠白介素27(IL-27)elisa檢測(cè)試劑盒       大鼠1,25二羥基維生素D3(1,25(OH)2D3/DVD/DHVD3)elisa檢測(cè)試劑盒

培養(yǎng)注意事項(xiàng) ：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。 
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。 
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。 
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。 
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。 
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。 
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后次傳代建議 1：2 傳代 。 
9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。