
細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)步驟:
?一、細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備?:
?生物柜的使用?:確保所有接觸細(xì)胞的物品都在生物柜中通過紫外,防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?:提供細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境,保持恒定的溫度(通常為37℃)?。
?培養(yǎng)基和血清?:特制的培養(yǎng)基包含各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如糖、氨基酸和維生素,添加胎牛血清和雙抗以提供生長(zhǎng)因子和防止污染?。
?二、細(xì)胞培養(yǎng)過程?:
?細(xì)胞接收與記錄?:記錄細(xì)胞系的相關(guān)信息,包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細(xì)胞形態(tài)觀察?:定期檢查細(xì)胞的形態(tài)和行為,確保細(xì)胞狀態(tài)健康,無污染?。
?細(xì)胞傳代?:當(dāng)細(xì)胞密度超過80%時(shí)進(jìn)行傳代,注意消化時(shí)間和條件,避免細(xì)胞損傷?。
三、?細(xì)胞系鑒定與維護(hù)?:
?細(xì)胞系鑒定?:通過STR圖譜確定細(xì)胞的遺傳特征,防止細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染?。
?細(xì)胞保存與管理?:定期進(jìn)行細(xì)胞冷凍保存,確保細(xì)胞的長(zhǎng)期存活和可用性?。
本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
商品屬性:
產(chǎn)品貨號(hào) |
A01X1137 |
凍存條件 |
無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存 |
產(chǎn)品分類 |
大鼠細(xì)胞系 |
產(chǎn)品種屬 |
大鼠 |
生長(zhǎng)特性 |
半貼壁生長(zhǎng) |
細(xì)胞形態(tài) |
巨噬細(xì)胞 |
英文名稱 |
NR8383:NR8383 |
組織來源 |
肺;巨噬細(xì)胞;肺泡 |
商品介紹:
細(xì)胞別稱:NR-8383; NR 8383; NR8383.1;
AgC11x3A; Normal Rat, August 3, 1983
種屬來源:大鼠
年齡性別:
組織來源:肺;巨噬細(xì)胞;肺泡
生長(zhǎng)特性:半貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):巨噬細(xì)胞
背景簡(jiǎn)介:NR8383 (正常大鼠,1983年)來源于肺灌洗時(shí)的正常大鼠肺泡巨噬細(xì)胞。細(xì)胞在gerbil肺細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)液存在下培養(yǎng)了大約8-9個(gè)月。隨后,不再需要外源生長(zhǎng)因子。通過有限稀釋法從單個(gè)細(xì)胞克隆并亞克隆NR8383細(xì)胞,并三次用軟瓊脂亞克隆。細(xì)胞表現(xiàn)出巨噬細(xì)胞的特性,吞噬酵母多糖和銅綠,非特異性脂酶活性,Fc受體,氧化降解;分泌IL-1, TGF-β和IL-6,可重復(fù)地響應(yīng)外源生長(zhǎng)因子。NR8383細(xì)胞響應(yīng)博萊霉素,分泌TGF-β前體。在博萊霉素刺激下,TGF –β mRNA表達(dá)也上升。細(xì)胞對(duì)內(nèi)敏感。1-10 鈉克/毫升的LPS水平抑制增生達(dá)50%。
即使達(dá)到0.001毫克/毫升的水平,LPS抑制還是無毒且在后續(xù)過程中可逆的。NR8383細(xì)胞株提供了高響應(yīng)的肺泡巨噬細(xì)胞的均一來源,可以用于體外研究巨響細(xì)胞相關(guān)活性。
生物等級(jí):1
細(xì)胞規(guī)格:1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測(cè):無
基因表達(dá)情況:transforming growth factor
beta (TGF beta); interleukin 1 (IL-1); interleukin 6 (IL-6)
保藏機(jī)構(gòu):ATCC; CRL-2192
培養(yǎng)基:85%F12K+15% FBS+PS
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件:無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
?公司正在出售的產(chǎn)品:
SLC9A9 復(fù)合素4抗體
CD85g抗體 LILRA4/CD85g
鋅指蛋白BED3抗體 Anti-ZBED3 鈉氫通道蛋白9家族A9抗體
磷酸化突觸結(jié)合蛋白1抗體 Anti-phospho-SYT1(Thr202) 晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體 Anti-RAGE
多配體聚糖結(jié)合蛋白2抗體 Anti-Syntenin 2 RNA聚合酶1和轉(zhuǎn)錄釋放因子抗體 Anti-PTRF
Bax相互作用因子1抗體 Bif
腎小球裂孔膜蛋白PDCN抗體 Anti-NPHS2/Podocin CPLX4
P-鈣粘附分子抗體 Anti-P-cadherin 環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體 Anti-TORC1/CRTC1鋅指蛋白81抗體 ZNF81
大鼠2,3-二磷酸甘油酸(2,3-BPG)elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)elisa生化檢測(cè)試劑盒
抗體 / 同型對(duì)照抗體
雞C反應(yīng)蛋白(CRP)elisa生化檢測(cè)試劑盒 CRP ELISA Kit
小鼠α羥基丁酸脫氫酶(αHBDH)elisa生化檢測(cè)試劑盒 αHBDHELISAKit
羊白介素7(IL7)elisa生化檢測(cè)試劑盒 IL7 ELISA kit
NR8383大鼠肺泡巨噬細(xì)胞人膀胱癌抗原(UBC)elisa生化檢測(cè)試劑盒 UBCELISAKit
寡核苷酸探針非同位素HRP化學(xué)發(fā)光法DNA南方雜交試劑盒 犬α-1/2干擾素(IFN-α1/2)elisa生化檢測(cè)試劑盒
培養(yǎng)注意事項(xiàng) :
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。