商品屬性：

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情：

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)方案A（默認(rèn)）

生長培養(yǎng)基:

RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)條件:

氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2-3次/周

參考資料(來源文獻(xiàn))

年齡（性別） 女性；35歲

組織來源 甲狀腺

細(xì)胞類型 轉(zhuǎn)化細(xì)胞系

生物等級 BSL-2

倍增時間 24-48 hours

保藏機構(gòu) ECACC; 90011609

TALLA-1       皮膚T細(xì)胞瘤相關(guān)抗原5抗體

黑色素瘤相關(guān)抗原B2抗體       MAGEB2

X射線修復(fù)交叉互補蛋白4抗體  Anti-XRCC4       T細(xì)胞急性母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原1抗體

PSD95結(jié)合蛋白2抗體  Anti-SAPAP2/DLGAP2       RFESD蛋白抗體  Anti-RFESD

細(xì)胞外基質(zhì)底物反應(yīng)蛋白2抗體  Anti-SPON2/M spondin/Mindin       磷酸化蛋白激酶C抗體  Anti-phospho-PRKCA(Thr637)

16號染色體開放閱讀框48抗體       C16orf48

核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1抗體  Anti-NUSAP1      CTAGE5

凋亡相關(guān)蛋白4抗體  Anti-PDCD4       tRNA剪接內(nèi)切酶2抗體  Anti-TSEN2G蛋白偶聯(lián)受體GPR85蛋白抗體       GPR85

小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)elisa檢測試劑盒免費代測       組蛋白西方雜交分析試劑盒

PE標(biāo)記豚鼠IgM       Guinea pig IgM / PE

大鼠膠原C末端肽(CTX)elisa生化檢測試劑盒       CTX ELISA Kit

小鼠CC趨化因子受體6(CCR-6)elisa生化檢測試劑盒       CCR-6ELISAKit

組織相容性抗原DRB4抗體       HLA-DRB4

Nthy-ori 3-1人甲狀腺正常細(xì)胞α/β水解酶4抗體       ABHD4

大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)elisa檢測試劑盒       冰凍切片組織CASPASE-1蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存。