商品屬性：

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情：

細(xì)胞別稱：RAW264; RAW2647; RAW264.7; RAW-264.7; Raw 264.7; Raw264.7；小鼠單核巨噬細(xì)胞

種屬來源：小鼠

年齡性別：雄；成年

組織來源：Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤；單核細(xì)胞；巨噬細(xì)胞

生長特性：貼壁生長，不用胰酶消化

細(xì)胞形態(tài)：單核細(xì)胞，巨噬細(xì)胞

背景簡介：RAW264.7細(xì)胞株源自Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤。sIg-, Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。此細(xì)胞株不分泌可檢測到的病毒顆粒，XC斑點(diǎn)形成試驗(yàn)陰性?？梢园嬛行约t并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖。可以抗體依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細(xì)胞。LPS或PPD處理2天可誘導(dǎo)分解紅血球但對腫瘤靶細(xì)胞無作用。   RAW264.7細(xì)胞容易分化，不建議用胰酶消化，或者密度過高才傳代

生物等級：2

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測：無

基因表達(dá)情況：lysozyme, H-2d; Tested and found negative for ectromelia virus (mousepox).

保藏機(jī)構(gòu)：ATCC; TIB-71 ECACC; 91062702

培養(yǎng)基：DMEM+10%FBS+PS

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存

倍增時間：~12-30小時

MMP11       雙特異性磷酸酶抗體21抗體

猴血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)elisa生化檢測試劑盒       FDP ELISA kit

人15-epi-氧脂素 A4(15-epi-LXA4)elisa生化檢測試劑盒       基質(zhì)金屬蛋白酶11抗體

小鼠核因子κB受體活化因子-1（RANK-1）elisa檢測試劑盒       大鼠8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)elisa檢測試劑盒

肉蛋白1抗體  Anti-TMEFF2       環(huán)指蛋白111抗體  Anti-RNF111

人肥大細(xì)胞類胰蛋白酶(MCT)elisa生化檢測試劑盒       MCTELISAKit

脘蛋白糖基化分型（glycoform）試劑盒      DUSP21

核分布基因E同源蛋白1抗體  Anti-NDE1       視神經(jīng)視網(wǎng)膜相關(guān)蛋白VAX2抗體  Anti-VAX2彈性蛋白微原纖維界面因子2抗體       EMILIN2

小鼠卵泡抑素(FS)elisa檢測試劑盒       大鼠肝素酶(HPA)elisa檢測試劑盒

Cy7標(biāo)記的兔抗人IgA       Rabbit Anti-Human IgA / Cy7

人白喉抗體(Diphtheria Ab)elisa生化檢測試劑盒       HumanDiphtheriaantibodyELISAKit

豬鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2β(CAMK2B/CAM2/CAMKB)elisa生化檢測試劑盒       PigCAMK2B/CAM2/CAMKBELISAkit

大鼠骨成型蛋白3(BMP-3)elisa生化檢測試劑盒       BMP-3 ELISA Kit

RAW 264.7+GFP小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞+GFP豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)elisa生化檢測試劑盒       TGF-β1ELISAKit

人蛋白酶3(PR3)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測       細(xì)胞組織S（CATHEPSIN S）活性熒光定量檢測試劑盒

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存。