
細胞系實驗步驟:
?一、細胞培養(yǎng)準備?:
?生物柜的使用?:確保所有接觸細胞的物品都在生物柜中通過紫外,防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?:提供細胞生長的環(huán)境,保持恒定的溫度(通常為37℃)?。
?培養(yǎng)基和血清?:特制的培養(yǎng)基包含各種營養(yǎng)物質(zhì),如糖、氨基酸和維生素,添加胎牛血清和雙抗以提供生長因子和防止污染?。
?二、細胞培養(yǎng)過程?:
?細胞接收與記錄?:記錄細胞系的相關(guān)信息,包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細胞形態(tài)觀察?:定期檢查細胞的形態(tài)和行為,確保細胞狀態(tài)健康,無污染?。
?細胞傳代?:當細胞密度超過80%時進行傳代,注意消化時間和條件,避免細胞損傷?。
三、?細胞系鑒定與維護?:
?細胞系鑒定?:通過STR圖譜確定細胞的遺傳特征,防止細胞系被誤認或交叉污染?。
?細胞保存與管理?:定期進行細胞冷凍保存,確保細胞的長期存活和可用性?。
本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
商品屬性:
產(chǎn)品貨號 |
A01X1100 |
凍存條件 |
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
產(chǎn)品分類 |
小鼠細胞系 |
產(chǎn)品種屬 |
小鼠 |
生長特性 |
貼壁細胞,不用胰酶消化 |
細胞形態(tài) |
不規(guī)則形 |
英文名稱 |
RAW 264.7:RAW 2647 |
組織來源 |
Abelson鼠科白血病病毒誘導的腫瘤;單核細胞;巨噬細胞 |
商品介紹:
生長特性 貼壁細胞,不用yi酶消化
細胞形態(tài) 不規(guī)則形
生長培養(yǎng)基 DMEM+10%
FBS+1% P/S
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
推薦傳代比例 1:6~1:8
推薦換液頻率 2~3次/周
注意事項 1、該細胞不建議使用yi酶消化,yi酶會刺激分化; 2、
超過3天不傳代細胞容易分化; 3、 培養(yǎng)時,存在少量分化細胞,屬于正?,F(xiàn)象。
背景描述 RAW 264.7細胞源自Abelson鼠科白血病病毒誘導的腫瘤;sIg-、Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。RAW
264.7細胞不分泌可檢測到的病毒顆粒,XC斑點形成試驗陰性。RAW
264.7細胞可以胞飲中性紅并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖,并且可以抗體依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細胞。LPS或PPD處理2天可誘導RAW 264.7細胞分解紅血球,但對腫瘤靶細胞無作用。
年齡(性別) 雄性,成年
組織來源 Abelson鼠科白血病病毒誘導的腫瘤;單核細胞;巨噬細胞
細胞類型 腫瘤細胞
腫瘤類型 白血病細胞
生物等級 2
倍增時間 ~12-30小時
受體表達情況 complement (C3)
抗原表達情況 H-2d
基因表達情況 lysozyme, H-2d; Tested and
found negative for ectromelia virus (mousepox).
保藏機構(gòu) ATCC; TIB-71 ECACC; 91062702
?公司正在出售的產(chǎn)品:
MSY2 下頜發(fā)育綜合征相關(guān)蛋白FAKD3抗體
倉鼠白介素2(IL-2)elisa生化檢測試劑盒 IL-2 ELISA Kit
小鼠生長分化因子11(GDF11)elisa檢測試劑盒 DNA結(jié)合蛋白C抗體
組織環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1/2)總活性熒光定量檢測試劑盒 人P選擇素(P-Selectin)elisa檢測試劑盒
跨膜蛋白161A抗體 Anti-TMEM161A 周期素D相關(guān)蛋白抗體 Anti-RUNX1T1/ETO
人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽(ETFB)elisa生化檢測試劑盒 HumanETFBELISAKit
大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)elisa生化檢測試劑盒 FAKD3
核有絲分裂器NuMA蛋白抗體 Anti-NuMA 細胞骨架相關(guān)蛋白抗體 Anti-SM22 Alpha內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氨基肽酶2抗體 ERAP2
細胞TEL激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 人抗中性粒細胞胞漿抗體(cANCA)elisa檢測試劑盒
Cy5標記的兔抗雞IgM Rabbit Anti-Chicken IgM / Cy5
人β1,4-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶2(B4GALNT2)elisa生化檢測試劑盒 HumanB4GALNT2ELISAKit
豬白介素1(IL-1)elisa生化檢測試劑盒 IL-1ELISAKit
大鼠縫隙連接蛋白α1,43kDa(GJA1)elisa生化檢測試劑盒 43kDa(GJA1)ELISA kit
RAW 264.7小鼠單核巨噬細胞白血病細胞豚鼠白介素17(IL-17)elisa生化檢測試劑盒 IL-17ELISAKit
豬α干擾素(IFN-α)elisa生化檢測試劑盒 大鼠激肽釋放酶6(KLK6)elisa檢測試劑盒
培養(yǎng)注意事項 :
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由 客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。