細(xì)胞培養(yǎng)操作：
1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
商品屬性：
產(chǎn)品名稱
英文名稱
RERF-LC-Ad2
產(chǎn)品貨號
AXB6630
培養(yǎng)條件
RPMI1640 medium
with 10% heat inactivated fetal calf serum.37 ℃, 5% CO2
生長特性
貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
90% FBS + 10% DMSO
組織來源
肺
用途
僅供科研研究實驗
種屬來源；人
組織來源；肺
性別年齡；
生長特性；貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞規(guī)格；1 X 106cells/T25或1 mL凍存管
培養(yǎng)條件；RPMI1640 medium with 10% heat
inactivated fetal calf serum.37 ℃, 5% CO2
凍存條件；90% FBS + 10% DMSO
傳代方法；1:3傳代, 2-3天傳1代
公司正在出售的產(chǎn)品：
PRL/LTH ELISA Kit 人二氫嘧啶酶樣2(DPYSL2)elisa分析檢測試劑盒
DPYSL2檢測試劑盒 豚鼠白介素5(IL-5)elisa檢測試劑盒
檢測試劑盒 猴催乳素(PRL/LTH)elisa分析檢測試劑盒
大鼠神經(jīng)肽Y(NPY)elisa檢測試劑盒 內(nèi)著絲粒蛋白抗體
ANKRD20A1 細(xì)胞線粒體復(fù)合物I蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒
通用型人體腺病毒（adenovirus）定性檢測試劑盒 魚Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa檢測試劑盒
INCENP 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A1抗體
犬白介素-6（IL－6）elisa檢測試劑盒 超微量ATP酶測試盒Na+K+、Ca2+Mg2+、T－ATP酶 50管/25樣 100管/50樣 比色法Proteasome 20S beta 3 CD83抗體
10號染色體開放閱讀框63抗體 C10orf63
小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)elisa檢測試劑盒 蛋白酶體PSMβ3抗體
CD83 葡萄膜自身抗原Uaca抗體 Anti-UACA
血小板47蛋白抗體 Anti-Pleckstrin/p47 多谷氨酰胺結(jié)合蛋白1抗體 Anti-PQBP1
12脂氧合酶抗體 Anti-ALOX12/12 Lipoxygenase PE-CY5標(biāo)記的羊抗人IgM
RERF-LC-Ad2人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞Goat Anti-Human IgM / PE-Cy5 鋅結(jié)合乙醇脫氫酶結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
細(xì)胞趨化因子抗體 Lymphotactin
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存。