商品屬性：

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情：

細(xì)胞介紹

RKO是一個低分化的結(jié)腸癌細(xì)胞系。 RKO細(xì)胞含有野生型P53，但缺乏人甲狀腺受體核受體(h-TR beta 1)。 RKO細(xì)胞的P53蛋白的水平高于RKO-E6細(xì)胞。 RKO細(xì)胞系是RKO-E6和RKO-AS45-1的親本細(xì)胞系。 該細(xì)胞系在裸鼠中成瘤，且在軟瓊脂中形成集落。

細(xì)胞特性

1） 來源：人，結(jié)腸癌

2） 形態(tài)：上皮樣細(xì)胞 貼壁生長

3） 含量：>1x10^6 細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5）用途：僅供科研使用。

植物蛋白提取試劑盒100T       PCR級無離子純水

小鼠蛋白聚糖4(PRG4)elisa分析檢測試劑盒       VEGF蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

體外非細(xì)胞系統(tǒng)血紅素氧合酶（HEME OXYGENASE）活性比色法定量檢測試劑盒       CASPASE-8蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

小鼠Discoidin域受體家族成員1(DDR1)elisa檢測試劑盒       磷酸化載脂蛋白A1抗體 phospho-CD95/FAS (Tyr291)

FAM116B蛋白抗體 FAM116B       鋅指蛋白773抗體 ZNF773

大鼠血管緊張素Ⅱ受體1(AGTR1)elisa檢測試劑盒       紙類檸檬酸比色法定量檢測試劑盒

磷脂酰肌醇-5-磷酸鹽-4激酶2型α抗體 PIP4K2A      EHBP1蛋白抗體 EHBP1

信號通路Wnt2B重組兔單克隆抗體 Wnt2b       程序性死亡1（CD279）抗體 PD-1絲氨酸合并蛋白3抗體（腫瘤差異表達(dá)蛋白） SERINC3       PE-Cy7標(biāo)記小鼠CD69單克隆抗體 mouse CD69/PE-Cy7

17號染色體開放閱讀框104抗體       C17orf104

單核細(xì)胞趨化蛋白5抗體 CCL12       水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白14B抗體 ABHD14B

PE標(biāo)記人CD95單克隆抗體 human CD95/PE       組織相容性抗原DP抗體 HLA-DPA1

1號染色體開放閱讀框106抗體 C1orf106       環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白H抗體 CREB3L3

肌球蛋白調(diào)節(jié)輕鏈12B抗體 MYL12B       組織線粒體/胞漿蛋白提取試劑盒100T

RKO人結(jié)腸癌細(xì)胞蘑菇β-葡聚糖含量酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒       豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)elisa檢測試劑盒

胰島素生長因子樣家族成員1抗體       IGFL1

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存。