商品屬性：

產(chǎn)品名稱	Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細(xì)胞	英文名稱	Sp2/0-Ag14:Sp20Ag14
產(chǎn)品貨號(hào)	A01X1108	培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%
生長特性	懸浮細(xì)胞	細(xì)胞形態(tài)	母細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	小鼠	凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來源	脾臟	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

生長特性 懸浮細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 母細(xì)胞樣

生長培養(yǎng)基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 3×10^5-5×10^5cells/mL

推薦換液頻率 2~3次/周

注意事項(xiàng) 該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞，請(qǐng)注意離心收集細(xì)胞懸液；請(qǐng)勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。

背景描述 Sp2/0-Ag14細(xì)胞是由綿羊紅細(xì)胞的BALB/c小鼠脾細(xì)胞和P3X63Ag8骨髓瘤細(xì)胞融合得到的。Sp2/0-Ag14細(xì)胞不分泌球蛋白，對(duì)20μg/ml的8-氮niao嘌呤有抗性，對(duì)HAT比較敏感；Sp2/0-Ag14細(xì)胞可以作為細(xì)胞融合時(shí)的B細(xì)胞組分用于制備雜交瘤；鼠痘病毒陰性。

組織來源 脾臟

細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型 骨髓瘤細(xì)胞

生物等級(jí) 1

抗原表達(dá)情況 H-2d

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-1581 ATCC;CRL-8287 DSMZ;ACC-146 ECACC;85072401

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品：

IL-3 ELISA Kit       人電子轉(zhuǎn)運(yùn)黃素蛋白-泛醌氧化還原酶/電子轉(zhuǎn)運(yùn)黃素蛋白脫氫酶(ETFDH)elisa分析檢測(cè)試劑盒

HumanETFDH檢測(cè)試劑盒       細(xì)胞GRK4激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

HMGB-1檢測(cè)試劑盒       倉鼠白介素3(IL-3)elisa分析檢測(cè)試劑盒

植物1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RuBisCO)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)       支架蛋白IQGAP2抗體

Apg10       細(xì)胞N-鏈接硫酸酯化糖胺多糖（N-sGAG）含量二甲基亞甲基藍(lán)（DMMB）比色法定量檢測(cè)試劑盒

人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)elisa檢測(cè)試劑盒       大鼠胱天蛋白酶7(CASP7)elisa檢測(cè)試劑盒

IQGAP2      自噬相關(guān)蛋白10抗體

小鼠白介素4(IL-4)elisa檢測(cè)試劑盒       單胺氧化酶測(cè)試盒RAB40A       表皮生長因子樣蛋白2抗體

CTAGE6蛋白抗體       CTAGE6

CYP1A2蛋白共沉淀分析試劑盒       RAS癌基因家族蛋白RAB40A抗體

CELSR2       葡萄糖神經(jīng)酰胺合成酶抗體  Anti-UGCG/Ceramide glucosyltransferase

泛酸激酶2抗體  Anti-PANK2       Ⅱ型膠原α1 N端前體肽抗體  Anti-procollagen type IIA

精神障礙相關(guān)GAP蛋白抗體  Anti-srGAP3       APC標(biāo)記的羊抗兔IgG H&L

Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細(xì)胞Goat Anti-Rabbit IgG H&L / APC       鋅指蛋白399抗體

脂肪水解酶LIPN抗體       LIPN/Lipase N