
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
MDCK
產(chǎn)品貨號
AXB10151
培養(yǎng)條件
氣相:95%空氣+5%二氧化碳;
生長特性
貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
狗
凍存條件
無血清凍存液,液氮儲存
組織來源
腎
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
商品詳情:
細(xì)胞別稱;MDCK;犬腎細(xì)胞
種屬來源;狗
年齡性別;雌性,成年
組織來源;腎
生長特性;貼壁生長
細(xì)胞形態(tài);上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞代數(shù);10代以內(nèi)
背景簡介;MDCK細(xì)胞系源自一只雌性英國可卡犬的腎臟組織,由S.H. Madin and N.B. Darby于1958年建立。該細(xì)胞為角蛋白陽性細(xì)胞。
使用權(quán)限;A類
細(xì)胞規(guī)格;1x106cells/T25或1mL凍存管
支原體檢測;無
培養(yǎng)基;MEM(ATCC改良)+10%FBS+PS
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件;無血清凍存液,液氮儲存
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Influenza A Polymerase basic protein 2 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域38抗體
ANKRD38 山羊結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)elisa檢測試劑盒
大鼠胸腺素β-4(TMSB4X)elisa檢測試劑盒 A型流感聚合酶堿性蛋白2抗體
大鼠載脂蛋白C3(Apo C3)elisa檢測試劑盒 莫洛尼白血病病毒蛋白10抗體
C1QL4 細(xì)胞表面糖蛋白Trop2抗體(胰腺癌標(biāo)志物蛋白) Anti-TROP2
植物性食物樣品處理試劑盒 /酵母細(xì)胞線粒體內(nèi)膜功能/膜電位紅色熒光(TMRE)測定試劑盒
Mov10 補(bǔ)體C1QL4鏈多肽抗體
核糖體蛋白L15抗體 Anti-RPL15 谷氨酸受體3A抗體 Anti-NMDAR3ATSP50 ATP依賴RNA解旋酶DDX52抗體
熱休克蛋白70蛋白7抗體 HSPA7
囊泡谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 Anti-VGLUT2 睪丸特異蛋白酶樣蛋白50抗體
DDX52 生長抑素受體1抗體 Anti-SSTR1/Somatostatin Receptor 1
胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白2抗體 Anti-Oct-2 細(xì)胞表面受體PILRβ抗體 Anti-PILR beta
轉(zhuǎn)錄因子Tbx5抗體 Anti-TBX-5 大鼠睪酮(T)elisa分析檢測試劑盒
犬腎細(xì)胞;MDCK-IT ELISA Kit 豚鼠球蛋白A(IgA)elisa分析檢測試劑盒
蛋白激酶C相關(guān)激酶1抗體 PKN1