商品屬性：

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情：

細(xì)胞別稱；NCI-H239；人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

種屬來源；人

組織來源；肺癌；非小細(xì)胞肺癌

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景簡介；NCI-H239細(xì)胞源于一位51歲患有非小細(xì)胞肺癌黑人男性患者的前的腫瘤組織，表達(dá)C-myc、L-myc、v-src、v-abl、v-erb B、c-raf 1、Ha-ras、Ki-ras、N-ras RNAs；該細(xì)胞攜帶K-ras 12突變；p53基因246位密碼子突變ATC→ATG；表達(dá)PDGF A和B鏈的異源mRNA；表達(dá)TGFα、TGFβ和EGFR；角蛋白 5、8和18陽性，波形蛋白陽性，神經(jīng)絲蛋白陰性，多巴脫氫酶陰性；據(jù)報道，在軟瓊脂中該細(xì)胞形成克隆的效率為9.7%。

細(xì)胞規(guī)格；1x106cells/T25或1mL凍存管

支原體檢測；無

培養(yǎng)基；RPMI-1640+10%FBS+1%雙抗

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存

KLHL26       細(xì)胞因子誘導(dǎo)蛋白29kDa抗體

CIP29       小鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)elisa檢測試劑盒

倉鼠低密度脂蛋白(VLDL)elisa分析檢測試劑盒       Kelch樣蛋白26抗體

人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)elisa分析檢測試劑盒       NDUFB6蛋白抗體

GAPT       跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白21抗體  Anti-TMP21

大鼠白介素1受體Ⅰ(IL1R1)elisa檢測試劑盒       血清/血漿游離脂肪酸酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒

NDUFB6      生長因子受體結(jié)合適應(yīng)蛋白抗體

鋅指蛋白RIZ1抗體  Anti-PRDM2       骨誘導(dǎo)因子抗體  Anti-OIFphospho-RAD9 (Ser272)       NSUN4蛋白抗體

人白介素28B(IL-28B)elisa生化檢測試劑盒       IL-28BELISAkit

14-3-3蛋白/14-3-3 α/β/γ/δ/ε亞型抗體  Anti-14-3-3 (Alpha, Beta, Gamma, Delta, Epsilon)       磷酸化細(xì)胞周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體

NSUN4       波形蛋白抗體  Anti-Vimentin

神經(jīng)束蛋白186抗體  Anti-Nfasc186       環(huán)指蛋白157抗體  Anti-RNF157

兔抗甲狀腺球蛋白  Anti-TG       大鼠表皮生長因子(EGF)elisa分析檢測試劑盒

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H239EGF ELISA Kit       人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/SDF1B)elisa分析檢測試劑盒

乙型流感HA elisa生化檢測試劑盒       Influenza B HA ELISA Kit

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存。