
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
HMC-1
產(chǎn)品貨號(hào)
AXB10313
培養(yǎng)條件
氣相:95%空氣+5%二氧化碳;
生長(zhǎng)特性
懸浮生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)
母細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
組織來(lái)源
外周血
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
商品詳情:
細(xì)胞別稱;HMC1; HMC-1; 人肥大細(xì)胞
種屬來(lái)源;人
年齡性別;52歲,男
組織來(lái)源;外周血
生長(zhǎng)特性;懸浮生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài);母細(xì)胞樣
細(xì)胞代數(shù);10代以內(nèi)
背景簡(jiǎn)介;來(lái)源于一名 52 歲男性肥大細(xì)胞白血病患者的外周血樣本。該細(xì)胞有多重亞型分別為:HMC-1 5C6,HMC-1.1 ,HMC-1.2 。廣泛用于人肥大細(xì)胞功能研究,因?yàn)樗鼈儽憩F(xiàn)出組織肥大細(xì)胞的許多關(guān)鍵特征,例如組胺、類胰蛋白酶、肝素和類似細(xì)胞表面抗原譜的表達(dá) (1,2)。受體酪氨酸激酶 KIT 在肥大細(xì)胞上表達(dá),在肥大細(xì)胞的增殖、功能和存活中起重要作用。KIT 中的激活突變與肥大細(xì)胞生長(zhǎng)失調(diào)有關(guān),并與肥大細(xì)胞腫瘤和系統(tǒng)性肥大細(xì)胞增多癥有關(guān)。據(jù)報(bào)道,HMC-1 細(xì)胞系中存在兩個(gè) KIT 激活點(diǎn)突變 。這兩種突變都將受體轉(zhuǎn)化為組成型酪氨酸磷酸化和活性狀態(tài),導(dǎo)致生長(zhǎng)因子非依賴性增殖。HMC-1.1 (HMC-1(560)) 和 HMC-1.2 (HMC-1(560,816)) 是HMC-1 細(xì)胞系的兩個(gè)變異亞系。HMC-1.1 具有 V560G 突變,但不具有 D816V 突變。HMC-1.2 同時(shí)具有 V560G 和D816V 突變,并且表現(xiàn)出比 HMC-1.1 更高的增殖率。有人認(rèn)為,HMC-1.2 的較高增殖潛力可能歸因于 D816V 突變。
STR位點(diǎn);AmelogeninX:CSF1PO:10,13;D2S1338:17,25;D3S1358:15;D5S818:12,13;D7S820:10,11;D8S1179:12 ;D13S317:10,11;D16S539:10,12;D18S51:14,20;D19S433:14;D21S11:29;FGA:18,20;Penta D:11;Penta :E9,19;TH01:7,9.3;TPOX:8,11;vWA:17,19
細(xì)胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測(cè);無(wú)
保藏機(jī)構(gòu);DSMZ;ACC-283
- Discontinued
培養(yǎng)基;IMDM+10%FBS+1%PS
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件;無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過(guò)度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
KIAA1841 染色質(zhì)修飾蛋白1B抗體
CHMP1B 大鼠腎腫瘤抗原(RAGE)elisa檢測(cè)試劑盒
通用腺病毒骨架載體(pAdEasy-1) KIAA1841蛋白抗體
糞便DNA分離試劑盒 造血蛋白1抗體
FOXI3 T細(xì)胞急性細(xì)胞性白血病1蛋白/瘤蛋白5抗體 Anti-Tal1
苯丙(PHE)氧化高效液相色譜 (HPLC)分析試劑盒 維生素B9含量測(cè)試盒
NCKAP1L FOXI3蛋白抗體
親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIA抗體 Anti-PPIA/Cyclophilin A/CYPA 固生蛋白M抗體 Anti-ODZ1/Tenascin MHSPβ7 神經(jīng)細(xì)胞粘附分子NrCAM抗體
人白介素29(IL-29)elisa生化檢測(cè)試劑盒 IL-29ELISAKit
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體 Anti-Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257/Thr261) 熱休克蛋白β7抗體
NrCAM 轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白1抗體 Anti-VGLL1
鼻咽癌細(xì)胞相關(guān)基因6抗體 Anti-NGX6/C9orf127 環(huán)指蛋白43抗體 Anti-RNF43
轉(zhuǎn)醛醇酶抗體 Anti-Transaldolase 1 大鼠叉頭框蛋白P3(FoxP3)elisa分析檢測(cè)試劑盒
人肥大細(xì)胞;HMC-1FOXP3 ELISA Kit 人甲狀旁腺(PTH)elisa分析檢測(cè)試劑盒
有機(jī)磷農(nóng)藥殘留試劑盒 Organophosphorus pesticide residue ELISA kit