
商品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng)
英文名稱(chēng)
HPAEC
產(chǎn)品貨號(hào)
AXB10637
培養(yǎng)條件
氣相:95%空氣+5%二氧化碳;
生長(zhǎng)特性
貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)
內(nèi)皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
組織來(lái)源
肺
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
商品詳情:
細(xì)胞別稱(chēng);HPAEC;人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
種屬來(lái)源;人
組織來(lái)源;肺
生長(zhǎng)特性;貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài);內(nèi)皮細(xì)胞樣
細(xì)胞代數(shù);10代以內(nèi)
細(xì)胞規(guī)格;1x106cells/T25或1mL凍存管
支原體檢測(cè);無(wú)
培養(yǎng)基;90%DMEM+10%FBS
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件;無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過(guò)度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
AMP含量測(cè)試盒 細(xì)胞CASPASE-3蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒
脂蛋白酯酶(LPL)測(cè)試盒 豬多肽YY(PYY)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠溶質(zhì)載體家族30成員10(SLC30A10)elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)elisa分析檢測(cè)試劑盒
小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)elisa分析檢測(cè)試劑盒 砷酸鹽耐藥蛋白ARS2抗體 ARS2
NLRP14蛋白抗體 NLRP14 豬藍(lán)耳病病毒N蛋白抗體 PRRSV-N protein
大鼠血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)elisa檢測(cè)試劑盒 啤酒糟β-葡聚糖含量化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒
神經(jīng)細(xì)胞鳥(niǎo)苷酸置換因子NGEF抗體 Ephexin-1 Myc tag標(biāo)簽單克隆抗體 Myc Tag
轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體 KLF9 冠狀病毒表面S蛋白抗體 SARS S-protein鋅指蛋白275抗體 ZFP275 半胱胺酸蛋白酶蛋白9-p10抗體 caspase-9 p10
人白介素8(IL-8/CXCL8)elisa生化檢測(cè)試劑盒 HumanInterleukin8ELISAKIT
核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ENT1抗體 ENT1 小鼠抗瘦素單克隆抗體 Leptin
丙酮酸脫氫酶激酶亞型2抗體 PDK2 CTAGE6蛋白抗體 CTAGE6
DNAJC5G蛋白抗體 DNAJC5G 磷酸化γ連環(huán)蛋白抗體 phospho-gamma Catenin (Tyr550)
磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體 phospho-ACLY (Ser455) 大鼠血管性血友病因子抗原vWF:Agelisa檢測(cè)試劑盒
人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞;HPAEC純化線粒體凍存液(生物能量學(xué)保護(hù)) 苯丙氨酸解氨酶PAL測(cè)試盒 50T/48樣 比色法
生長(zhǎng)(GH)elisa生化檢測(cè)試劑盒 GH ELISA kit