
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
SK-HEP-1-LUC-EGFP
產(chǎn)品貨號
AXB10717
培養(yǎng)條件
氣相:95%空氣+5%二氧化碳;
生長特性
貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
詳見說明
組織來源
肝臟
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
商品詳情:
細(xì)胞別稱;SK-HEP-1-LUC-EGFP;人肝癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記-綠色熒光蛋白;人肝癌細(xì)胞-LUC-EGFP
種屬來源;人
年齡性別;男,52歲
組織來源;肝臟
生長特性;貼壁生長
細(xì)胞形態(tài);上皮細(xì)胞樣
puro藥篩濃度;SK-HEP-1-LUC-EGFP細(xì)胞puro藥篩濃度為1.0ug/ml,培養(yǎng)過程中建議使用0.5ug/ml濃度puro維持
細(xì)胞代數(shù);10代以內(nèi)
背景簡介;SK-HEP-1細(xì)胞已被鑒定為內(nèi)皮來源。SK-HEP-1細(xì)胞為異倍體女性人(XX),染色體在亞三倍體范圍內(nèi)。在裸鼠中,SK-HEP-1細(xì)胞能形成與肝癌相一致的大細(xì)胞癌。Luciferase SK-HEP-1細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲熒光素酶。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時(shí)不需要添加維持??捎米魑灮鹣x熒光素酶活性檢測中的陽性對照,也可用于活體動物成像實(shí)驗(yàn)。SK-HEP-1細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc和EGFP基因。
STR位點(diǎn);Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:8,12;D16S539:12;D18S51:13,15;D21S11:29,31;D3S1358:15,16;D5S818:10,13;D7S820:8,11;D8S1179:13,14;FGA:17;PentaD:13,14;PentaE:13,21;TH01:7,9;TPOX:9;vWA:14,17
生物等級;1
細(xì)胞規(guī)格;1×106cells/T25或1mL凍存管
支原體檢測;無
培養(yǎng)基;DMEM+10%FBS+PS+1. 0ug/ml puro
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Matriptase 3 19號染色體開放閱讀框29抗體
C19orf29 人EB病毒衣殼抗原(EBVCA)抗體(IgM)elisa分析檢測試劑盒
重組腺病毒PCR鑒定試劑盒 蛋白裂解酶3抗體
大鼠核糖核酸酶T2(RNASET2)elisa檢測試劑盒 原鈣粘蛋白γA5抗體
Cathepsin H mini chain 四分子交聯(lián)體5抗體 Anti-Tetraspan 5
組織B-RAF激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 小鼠趨化因子C-C-基元受體1(CCR1)elisa檢測試劑盒
PCDHGA5 組織蛋白酶H迷你鏈抗體
p21蛋白抗體 Anti-P21/CDKN1A 過氧化還原酶5/6抗體 Anti-PRDX5/PRDX6Rabbit Anti-Dog IgG H&L / PE-Cy5 對接蛋白EFS抗體
人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)elisa生化檢測試劑盒 HumanALCAMELISAKit
突觸相關(guān)蛋白23抗體 Anti-SNAP23 PE-CY5標(biāo)記的兔抗狗IgG H&L
EFS 細(xì)胞周期蛋白1結(jié)合蛋白抗體 Anti-ZNHIT1/CGBP1
神經(jīng)上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化基因1抗體 Anti-NET1/Glyt2 受體結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶2抗體 Anti-RIP2
單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 Anti-SLC16A7/MCT2 大鼠Bcl-2樣蛋白1(Bcl2-L-1/Bcl-X)elisa分析檢測試劑盒
人肝癌細(xì)胞;SK-HEP-1-luc-EGFPBcl2-L-1/Bcl-X ELISA Kit 人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)elisa分析檢測試劑盒
鴨白介素8(IL-8/CXCL8)elisa生化檢測試劑盒 IL-8 ELISA Kit