商品屬性：

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情：

細(xì)胞別稱；93T449；人高分化脂肪肉瘤細(xì)胞

種屬來源；人

特征；脂肪肉瘤

組織來源；脂肪

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；成纖維細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景介紹；93T449細(xì)胞系是由68歲女性腹膜后的高分化脂肪肉瘤建立的。這種脂肪肉瘤的核型和分子特征表明存在環(huán)狀和大的標(biāo)記染色體，它們包含MDM2，CDK4和HMGA2擴(kuò)增

生物等級(jí)；1

細(xì)胞規(guī)格；1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)；無

培養(yǎng)基；DMEM+10% FBS+PS

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

MICAL2       1號(hào)染色體開放閱讀框189抗體

C1orf189       大鼠甲狀腺球蛋白(TG)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠葉酸(FA)elisa檢測(cè)試劑盒       黃素蛋白氧化還原酶MICAL2抗體

細(xì)胞培養(yǎng)基比色法定量檢測(cè)試劑盒       磷脂酰肌醇3磷酸激酶5Ⅲ型抗體

CCDC69       環(huán)指蛋白9抗體  Anti-TRIM10/RNF9

豬化學(xué)趨化因子(KC)elisa檢測(cè)試劑盒       人內(nèi)皮素（ET-1）elisa檢測(cè)試劑盒

PIP5K3      卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白69抗體

腦蛋白4抗體  Anti-PGBD1/Cerebral protein 4       過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體  Anti-PGC1 betaRabbit Anti-Human IgA / PE-Cy7       ELOVL7蛋白抗體

人鼻病毒(RV)抗體(IgA)elisa生化檢測(cè)試劑盒       Humanrhinovirus(RV)antibody(IgA)ELISAkit

抑蛋白5抗體  Anti-ST5/DENND2B       PE-Cy7標(biāo)記的兔抗人IgA

ELOVL7       鋅指蛋白BED抗體  Anti-ZBED2

轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)蛋白NKX6.1抗體  Anti-NKX6.1       絡(luò)絲蛋白抗體  Anti-RELN/Reelin

泛素樣蛋白Sumo2抗體  Anti-Sumo 2       大鼠 Klotho elisa分析檢測(cè)試劑盒

人高分化脂肪肉瘤細(xì)胞；93T449Rat Klotho ELISA Kit       人分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)elisa分析檢測(cè)試劑盒

羊胰島素樣生長因子II(IGF2)elisa生化檢測(cè)試劑盒    

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。