商品屬性：

產(chǎn)品名稱	人紅系白血病細胞；TF-1 (STR)	英文名稱	TF-1
產(chǎn)品貨號	AXB9916	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長特性	半貼半懸	細胞形態(tài)	母細胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
組織來源	骨髓	用途	僅供科研研究實驗

商品詳情：

細胞別稱；TF1; MFD-1；TF-1；人紅白血病細胞

種屬來源；人

年齡性別；男；35歲

組織來源；骨髓

生長特性；半貼半懸

細胞形態(tài)；母細胞樣

細胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景介紹；TF-1細胞系1987年由Kitamura T等建立，源于一名35歲日本男性的肝素化骨髓抽取樣本，該患者具有嚴重的全血細胞減少癥。細胞生長完全依賴于IL-3或GM-CSF，對IL-5無反應(yīng)。多種因子和細胞因子對該細胞都有作用，如：IL-1、IL-4、IL-6、IL-9、IL-11、IL-13、CSF、LIF、NGF。該細胞不表達血型糖蛋白A和碳酸酐酶I。由該細胞的形態(tài)和細胞化學(xué)特征及珠蛋白基因的組成性表達，顯示該細胞屬于紅系。氯高鐵血紅素和δ氨基乙酰丙酸誘導(dǎo)細胞合成血紅蛋白，TPA刺激細胞向巨噬細胞樣細胞分化。

STR位點；Amelogenin：X，Y；CSF1PO：12，13；D13S317：8，9；D16S539：9，12；D18S51：13；D19S433：14，16；D21S11：30；D2S1338：19；D3S1358：15；D5S818：13；D7S820：12；D8S1179：11，15；FGA：18，19；TH01：7，9；TPOX：8；vWA：15，17；

生物等級；1

細胞規(guī)格；1x106cells/T25或1mL凍存管

支原體檢測；無

保藏機構(gòu)；ATCC; CRL-2003 DSMZ; ACC-334 ECACC; 93022307

培養(yǎng)基；RPMI-1640+10%FBS+2ng/ml rhGM-CSF+1%PS

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存

細胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。
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