商品屬性：

產(chǎn)品名稱	人結(jié)腸癌細(xì)胞帶熒光素酶；HCT-116/GFP (STR)	英文名稱	HCT-116/GFP
產(chǎn)品貨號	AXB10002	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長特性	貼壁生長	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
組織來源	結(jié)腸	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

細(xì)胞別稱；HCT116-LUC-PURO；人結(jié)腸腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記；人結(jié)腸腺癌細(xì)胞-LUC-PURO

種屬來源；人

組織來源；結(jié)腸

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；p3-p8

背景介紹；Luciferase HCT 116細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲熒光素酶。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定，培養(yǎng)時(shí)不需要添加維持?？捎米魑灮鹣x熒光素酶活性檢測中的陽性對照，也可用于活體動(dòng)物成像實(shí)驗(yàn)。該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。HCT 116細(xì)胞是由M&middotBrattain等人于1979年從患結(jié)腸癌的男性病人中分離的三株惡性細(xì)胞中的一株。HCT 116細(xì)胞在半固體瓊脂糖培養(yǎng)基中形成克隆HCT 116細(xì)胞在無胸腺裸鼠有致瘤性，形成腫瘤結(jié)節(jié)。

生物等級；1

細(xì)胞規(guī)格；1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測；無

保藏機(jī)構(gòu)；ATCC; CCL-247 BCRC; 60349 BCRJ; 0288 DSMZ; ACC-581

培養(yǎng)基；McCoy's 5a+10% FBS+PS+1. 0ug/ml puro

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品：

Influenza A Nuclear export protein       22號染色體開放閱讀框40抗體

C22orf40       山梨醇脫氫酶測試盒

大鼠纖連蛋白(FN)elisa檢測試劑盒       A型流感病毒核輸出蛋白抗體

大鼠乙酰膽堿(Ach)elisa檢測試劑盒       單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白13抗體

E2F7       20號染色體開放閱讀框11抗體  Anti-TWA1/C20orf11

飲料比色法定量檢測試劑盒       胚胎干細(xì)胞（ES）基礎(chǔ)培養(yǎng)基

MOT13      轉(zhuǎn)錄因子E2F7抗體

核糖體蛋白L19抗體  Anti-RPL19       核孔蛋白1抗體  Anti-NPAP1TSC1       線粒體核糖體蛋白S6抗體

人補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)elisa生化檢測試劑盒       C3SPELISAKit

神經(jīng)視錐蛋白樣1抗體(神經(jīng)鈣蛋白)  Anti-VILIP1       結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體

MRPS6       信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體  Anti-STAT2

胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白1抗體  Anti-Oct-1       磷酸化DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體  Anti-Phospho-p95 NBS1 (Ser343)

跨膜蛋白9家族成員4抗體  Anti-TM9SF4       大鼠鉤端螺旋體IgG(Leptospira IgG)elisa分析檢測試劑盒

人結(jié)腸癌細(xì)胞帶熒光素酶；HCT-116/GFP (STR)Rat Leptospira IgG ELISA Kit       豚鼠球蛋白E(IgE)elisa分析檢測試劑盒

魚果糖1,6-二磷酸酶elisa生化檢測試劑盒       6-diphosphatase ELISA Kit