
細胞系實驗步驟:
?一、細胞培養(yǎng)準(zhǔn)備?:
?生物柜的使用?:確保所有接觸細胞的物品都在生物柜中通過紫外,防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?:提供細胞生長的環(huán)境,保持恒定的溫度(通常為37℃)?。
?培養(yǎng)基和血清?:特制的培養(yǎng)基包含各種營養(yǎng)物質(zhì),如糖、氨基酸和維生素,添加胎牛血清和雙抗以提供生長因子和防止污染?。
?二、細胞培養(yǎng)過程?:
?細胞接收與記錄?:記錄細胞系的相關(guān)信息,包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細胞形態(tài)觀察?:定期檢查細胞的形態(tài)和行為,確保細胞狀態(tài)健康,無污染?。
?細胞傳代?:當(dāng)細胞密度超過80%時進行傳代,注意消化時間和條件,避免細胞損傷?。
三、?細胞系鑒定與維護?:
?細胞系鑒定?:通過STR圖譜確定細胞的遺傳特征,防止細胞系被誤認或交叉污染?。
?細胞保存與管理?:定期進行細胞冷凍保存,確保細胞的長期存活和可用性?。
本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
商品屬性:
產(chǎn)品貨號 |
AXB10005 |
凍存條件 |
無血清凍存液,液氮儲存 |
產(chǎn)品分類 |
人細胞系 |
產(chǎn)品種屬 |
人 |
生長特性 |
貼壁生長 |
細胞形態(tài) |
上皮細胞樣 |
英文名稱 |
HT-29/LUC |
組織來源 |
結(jié)腸 |
商品介紹:
細胞別稱;HT29-LUC;人結(jié)腸癌細胞-LUC;人結(jié)腸癌細胞株-熒光素酶標(biāo)記
種屬來源;人
組織來源;結(jié)腸
生長特性;貼壁生長
細胞形態(tài);上皮細胞樣
背景介紹;Luciferase HT-29細胞穩(wěn)定表達螢火蟲熒光素酶。該細胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時不需要添加維持??捎米魑灮鹣x熒光素酶活性檢測中的陽性對照,也可用于活體動物成像實驗。該細胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。HT-29細胞是由J·Fogh在1964年用移植培養(yǎng)方法和含15%FBS的F12培養(yǎng)液從原發(fā)性腫瘤分離的近來,已建株的培養(yǎng)細胞用含相同血清McCoy's5A培液培養(yǎng)。HT-29細胞在裸鼠中致瘤,也能在類固醇處理的地鼠中致瘤。HT-29細胞合成IgA、CEA、蛋白綁定TGF-&beta的分泌成分和粘液素等。
細胞代數(shù);p3-p8
生物等級;1
細胞規(guī)格;1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測;無
保藏機構(gòu);ATCC; HTB-38 BCRJ; 0111 CCLV;
CCLV-RIE 0960 DSMZ; ACC-299 ECACC; 91072201
培養(yǎng)基;90%5A+10% FBS+PS+1.0ug/ml puro
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件;無血清凍存液,液氮儲存
?公司正在出售的產(chǎn)品:
Integrin alpha 9 膜粘連蛋白9抗體
Annexin A9 PDGF-A蛋白表達西方雜交分析試劑盒
牛Ⅲ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)elisa檢測試劑盒 整合素α9抗體
小鼠骨涎蛋白(BSP)elisa檢測試劑盒 MRGPRH蛋白抗體
C20ORF144 轉(zhuǎn)導(dǎo)素β1X連鎖蛋白抗體 Anti-TBL1X
γ氨基丁酸(GABA)elisa分析檢測試劑盒 北方雜交完全試劑盒
MRGPRH 20號染色體開放閱讀框144抗體
視黃醇結(jié)合蛋白4抗體 Anti-RBP4 核孔蛋白50抗體 Anti-NUP50Ube2G2 防御素β-113/β-defensin 113抗體
人補體7(C7)elisa生化檢測試劑盒 HumanComplement7ELISAKit
滑膜肉瘤X斷點蛋白5抗體 Anti-SSX5 泛素蛋白連接酶G2抗體
DEFB113 絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體 Anti-SEK1/MKK4/MAP2K4
磷酸化一氧化氮合成酶3(內(nèi)皮型)抗體 Anti-Phospho-eNOS (Thr495) 磷酸化蛋白激酶C mu型抗體 Anti-phospho-PRKD1(Tyr463)
味覺受體蛋白家族2亞基60抗體 Anti-T2R60 大鼠甘油三酯(TG)elisa分析檢測試劑盒
人結(jié)腸癌細胞帶熒光素酶;HT-29/LUC (STR)TG ELISA Kit 豚鼠端粒酶(TE)elisa分析檢測試劑盒
魚過氧化氫酶(CAT)elisa生化檢測試劑盒 CAT ELISA kit
培養(yǎng)注意事項 :
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。