商品屬性：

產(chǎn)品名稱	人結(jié)腸腺癌細(xì)胞;RKO-LUC-EGFP	英文名稱	RKO-LUC-EGFP
產(chǎn)品貨號(hào)	AXB10721	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
組織來(lái)源	結(jié)腸	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

細(xì)胞別稱；RKO-LUC-EGFP；人結(jié)腸腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記-綠色熒光標(biāo)記；人結(jié)腸腺癌細(xì)胞-LUC-EGFP

種屬來(lái)源；人

組織來(lái)源；結(jié)腸

生長(zhǎng)特性；貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景簡(jiǎn)介；Luciferase RKO細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲(chóng)熒光素酶。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定，培養(yǎng)時(shí)不需要添加維持?？捎米魑灮鹣x(chóng)熒光素酶活性檢測(cè)中的陽(yáng)性對(duì)照，也可用于活體動(dòng)物成像實(shí)驗(yàn)。該細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。RKO細(xì)胞是一個(gè)低分化的結(jié)腸癌細(xì)胞系。RKO細(xì)胞含有野生型p53，但缺乏人甲狀腺受體核受體(h-TRβ1)。RKO細(xì)胞的p53蛋白的水平高于RKO-E6細(xì)胞，RKO細(xì)胞是RKO-E6細(xì)胞和RKO-AS45-1細(xì)胞的親本細(xì)胞系。RKO細(xì)胞在裸鼠中成瘤，且在軟瓊脂中形成集落。

生物等級(jí)；1

細(xì)胞規(guī)格；1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)；無(wú)

保藏機(jī)構(gòu)；ATCC; CRL-2577

培養(yǎng)基；90%MEM+10%FBS+PS+1. 0ug/ml puro

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品：

單胺氧化酶測(cè)試盒       人調(diào)寧蛋白-1(CNN1)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

HHV6-B（HUMAN HERPESVIRUS 6-B）病毒       人丙酮酸激酶M2型工酶(M2-PK)elisa分析檢測(cè)試劑盒

大鼠腫瘤壞死因子γ(TNF-γ)elisa檢測(cè)試劑盒       大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠蛋白激酶Cζ(PKCζ)elisa檢測(cè)試劑盒       神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3前蛋白抗體 Neurotrophin 3

Pacific Blue標(biāo)記小鼠CD103單克隆抗體 mouse CD103/Pacific Blue       轉(zhuǎn)錄因子SOX18抗體 SOX18

細(xì)胞NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒       小鼠抗弓形蟲(chóng)IgM抗體elisa分析檢測(cè)試劑盒

石骨癥相關(guān)蛋白PLEKHM1抗體 PLEKHM1      NSUN3蛋白抗體 NSUN3

阻抑素/腫瘤抑制因子抗體 Prohibitin       核孔復(fù)合蛋白Nup43抗體 NUP43鋅指蛋白717抗體 ZNF717       補(bǔ)體C1qTNF8鏈多肽抗體 C1QTNF8

人補(bǔ)體蛋白4(C4)elisa生化檢測(cè)試劑盒       C4ELISAKit

核因子κB抑制蛋白樣蛋白1抗體 NFKBIL1       鋅指蛋白33A抗體 ZNF33A/ZNF11

成骨細(xì)胞特異性因子2重組兔單克隆抗體 Periostin       DNA聚合酶α3抗體 POLD3

ECM29蛋白抗體 ECM29       磷酸化核有絲分裂器NuMA蛋白抗體 Phospho-NUMA1 (Ser395)

磷酸化造血祖細(xì)胞激酶抗體 phospho-MAP4K1 (Ser171)       體液環(huán)氧化酶（CYCLOOXYGENASE-1/2）總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

人結(jié)腸腺癌細(xì)胞;RKO-LUC-EGFP人HSP60 IgA抗體elisa分析檢測(cè)試劑盒       大鼠Toll樣受體2(TLR-2)elisa檢測(cè)試劑盒

魚(yú)黃體**素(LH)elisa生化檢測(cè)試劑盒       LH ELISA Kit