
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
HEK-293
產(chǎn)品貨號(hào)
AXB10314
培養(yǎng)條件
氣相:95%空氣+5%二氧化碳;
生長(zhǎng)特性
貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
組織來(lái)源
胚胎腎
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
商品詳情:
細(xì)胞別稱;Hek293; HEK-293; HEK 293;
HEK:293; 293; 293 HEK; Human Embryonic Kidney 293
種屬來(lái)源;人
年齡性別;胎兒
組織來(lái)源;胚胎腎
生長(zhǎng)特性;貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài);上皮細(xì)胞樣
背景簡(jiǎn)介;293 [HEK-293]細(xì)胞是剪切過(guò)的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞形成的永生化細(xì)胞,293 [HEK-293]細(xì)胞包含并表達(dá)轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報(bào)道中指出,293 [HEK-293]細(xì)胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA,但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過(guò)對(duì)Ad5的插入點(diǎn)的克隆測(cè)序發(fā)現(xiàn),Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293
[HEK-293]細(xì)胞19號(hào)染色體(19q13.2)。293 [HEK-293]細(xì)胞為人類腺病毒載體擴(kuò)增的宿主,可表達(dá)異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。
STR位點(diǎn);Amelogenin:X;CSF1PO:7,12;D13S317:12;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:15,18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19;
特別注意;該細(xì)胞貼壁不牢,運(yùn)輸過(guò)程中細(xì)胞會(huì)有脫落,如細(xì)胞脫落,請(qǐng)離心收集,消化后重新鋪瓶
生物等級(jí);2
細(xì)胞規(guī)格;1x106cells/T25或1mL凍存管
支原體檢測(cè);無(wú)
保藏機(jī)構(gòu);ATCC; CRL-1573 ATCC: PTA-4488 DSMZ: ACC-305 ECACC: 85120602
培養(yǎng)基;90% MEM+10% FBS+PS
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件;無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過(guò)度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
IFNA14 粘合連接相關(guān)蛋白1抗體
AJAP1 人NOD樣受體(NLR)elisa分析檢測(cè)試劑盒
PON1檢測(cè)試劑盒 干擾素alpha 14蛋白抗體
大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)elisa檢測(cè)試劑盒 MEX3A蛋白抗體
C1orf172 磷酸化埃茲蛋白抗體 Anti-Phospho-Ezrin (Tyr146)
血液果糖-1,6-二磷酸醛縮酶(ALD)定量檢測(cè)試劑盒 小鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)elisa分析檢測(cè)試劑盒
MEX3A 1號(hào)染色體開放閱讀框172抗體
RhoB蛋白抗體 Anti-Rho B 核小體組裝蛋白1抗體 Anti-NAP1L1TRA2A S期激酶活化蛋白DBF4A抗體
人促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)elisa生化檢測(cè)試劑盒 ACTHELISAkit
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子B抗體 Anti-VEGF-B TRA2A蛋白抗體
DBF4A 精子頂端體相關(guān)蛋白7抗體 Anti-SPAC7/C13ORF28
增食欲素B/欲B Anti-Orexin B 磷酸化蛋白激酶C(T500)抗體 Anti-phospho-PRKCZ(Thr500)
胸腺素抗體 Anti-Thymulin 狗IgG(親和純化)
人胚腎細(xì)胞;HEK-293Dog IgG 血紅素抗體
植物活性氧(ROS)elisa生化檢測(cè)試劑盒 ROS ELISA kit