商品屬性：

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情：

細(xì)胞別稱：HFSF-PI3；HFSF；人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞

種屬來(lái)源：人

年齡性別：胚胎

組織來(lái)源：胚胎眼鞏膜

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

背景簡(jiǎn)介：HFSF細(xì)胞是由北京眼科研究所建系。

使用權(quán)限:A類

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)：無(wú)

基因表達(dá)情況：

保藏機(jī)構(gòu)：中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心

培養(yǎng)基：DMEM-H+10% FBS+1% PS

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

倍增時(shí)間：

STR鑒定位點(diǎn)Amelogenin：X，Y；CSF1PO：10，12；D13S317：10，11；D16S539：9，13；D18S51：17，18；D19S433：13，14；D21S11：31，32.2；D2S1338：18，19；D3S1358：15；D5S818：10，12；D7S820：11；D8S1179：10，16；FGA：18，22；TH01：7，10；TPOX：8；vWA：14；

KCNC1       琥珀酸裂解酶抗體

Argininosuccinate Lyase       小鼠高遷移率族蛋白1(HMG1)elisa檢測(cè)試劑盒

小鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體 elisa分析檢測(cè)試劑盒       離子通道蛋白Kv3.1抗體

丙酸含量測(cè)試盒       MXI1蛋白抗體

C2orf68       味覺(jué)受體蛋白家族2亞基16抗體  Anti-TAS2R16

糞便DNA高質(zhì)純化試劑盒       細(xì)胞P21蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒

MXI1      2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框68抗體

磷酸化減數(shù)分裂重組蛋白家族REC8抗體  Anti-phospho-REC8(Ser251)       核因子κB抑制蛋白α抗體  Anti-NFKBIA/IKB alphaZSCAN4       二氫乳清酸脫氫酶抗體

人單胺氧化酶(MAO)elisa生化檢測(cè)試劑盒       MAOELISAKit

細(xì)胞S期激酶相關(guān)蛋白2抗體  Anti-SKP2/skp2 p45       ZSCAN4蛋白抗體

DHODH       鞘氨醇激酶1抗體  Anti-SPHK1

膜相關(guān)蛋白Numb抗體  Anti-NUMB       環(huán)指蛋白139抗體  Anti-RNF139

微管蛋白β tubulin抗體 Tubulin β  Anti-tubulin Beta       大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)elisa分析檢測(cè)試劑盒

人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞系；HFSF (STR)FASL ELISA Kit       山羊丙二醛(MDA)elisa分析檢測(cè)試劑盒

環(huán)磷酸腺苷(cAMP)elisa生化檢測(cè)試劑盒       cAMP ELISA Kit

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。