
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 |
英文名稱 |
MSC-EGFP-LUC |
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產(chǎn)品貨號(hào) |
AXB10709 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:95%空氣+5%二氧化碳; |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁生長(zhǎng) |
細(xì)胞形態(tài) |
梭形細(xì)胞樣 |
產(chǎn)品種屬 |
人 |
凍存條件 |
詳見說明 |
組織來源 |
臍帶 |
用途 |
僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
商品詳情:
細(xì)胞別稱;MSC-EGFP-LUC;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞-綠色熒光蛋白-熒光素酶標(biāo)記;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞-EGFP-LUC
種屬來源;人
組織來源;臍帶
生長(zhǎng)特性;貼壁生長(zhǎng)
形態(tài)特征;梭形細(xì)胞樣
puro藥篩濃度;MSC細(xì)胞puro藥篩濃度為1.0ug/ml,培養(yǎng)過程中建議使用0.5ug/ml濃度puro維持
質(zhì)量檢測(cè);人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等
產(chǎn)品規(guī)格;1x106cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基;MSC-EGFP-LUC人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞-綠色熒光蛋白-熒光素酶標(biāo)記培養(yǎng)基(IML-099-1)
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
背景簡(jiǎn)介;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞是一種能分化成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和軟骨細(xì)胞的多能干細(xì)胞。其具有強(qiáng)大的殖能力,且參與構(gòu)成造血微環(huán)境,因此被廣泛應(yīng)用于組織工程,細(xì)胞和基因。Luciferase MSC細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲熒光素酶和綠色熒光蛋白。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時(shí)不需要添加維持??捎米魑灮鹣x熒光素酶活性檢測(cè)中的陽性對(duì)照,也可用于活體動(dòng)物成像實(shí)驗(yàn)。MSC細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。
傳代方法;1:3至1:5,每周2- 3次

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細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。