
商品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng)
英文名稱(chēng)
EC9706
產(chǎn)品貨號(hào)
AXB10612
培養(yǎng)條件
氣相:95%空氣+5%二氧化碳;
生長(zhǎng)特性
貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
組織來(lái)源
食管癌
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
商品詳情:
細(xì)胞別稱(chēng);EC9706 ;人食管癌細(xì)胞
種屬來(lái)源;人
組織來(lái)源;食管癌
生長(zhǎng)特性;貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài);上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞代數(shù);10代以?xún)?nèi)
細(xì)胞規(guī)格;1x106cells/T25或1mL凍存管
支原體檢測(cè);無(wú)
培養(yǎng)基;DMEM+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件;無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過(guò)度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
二抗稀釋液(Western)100ml 人血管緊張素(ANG )elisa檢測(cè)試劑盒
飲料果膠生物酶比色法定量檢測(cè)試劑盒 人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)elisa分析檢測(cè)試劑盒
雞HSP90抗體(IgM)elisa分析檢測(cè)試劑盒 大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè) 絲氨酸蛋白酶23抗體 PRSS23
PSD95結(jié)合蛋白3抗體 SAPAP3 19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框2重組兔單克隆抗體 URI1
細(xì)胞溶酶體脂酶(酸性脂酶)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 小鼠血小板激活因子(PAF)elisa檢測(cè)試劑盒
酸性神經(jīng)酰胺酶1抗體 ASAH1 PE標(biāo)記人CD49b單克隆抗體 human CD49b/PE
20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框202抗體 C20orf202 磺氨基葡糖硫酸胺酶抗體 SGSH血紅蛋白ε抗體 Hemoglobin subunit epsilon 蛋白激酶B重組兔單克隆抗體 AKT1
人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4(LRP-4)elisa生化檢測(cè)試劑盒 HumanLRP-4ELISAKit
肌球蛋白重鏈1抗體 MYO1A 嗅覺(jué)受體51V1抗體 OR51V1
蛋白質(zhì)磷酸酶2A (alpha + beta)抗體 PP2A alpha + beta FAM55C蛋白抗體 FAM55C
FITC標(biāo)記大鼠CD86(B7-2)單克隆抗體 Rat CD86(B7-2)/FITC 磷酸化腫瘤抑制基因PTEN重組兔單克隆抗體 Phospho-PTEN (Ser380)
膜相關(guān)環(huán)指蛋白9抗體 9-Mar 組織磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCase)活性
人食管癌細(xì)胞;EC9706人補(bǔ)體片斷3a(C3a)elisa分析檢測(cè)試劑盒 大鼠大內(nèi)皮素1elisa分析檢測(cè)試劑盒
β內(nèi)啡肽(β-EP)elisa生化檢測(cè)試劑盒 β-EP ELISA Kit