商品屬性：

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情：

細(xì)胞別稱(chēng)；MKN-45-LUC；人胃癌細(xì)胞株-熒光素酶標(biāo)記；人胃癌細(xì)胞-LUC

種屬來(lái)源；人

組織來(lái)源；胃

生長(zhǎng)特性；貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

背景介紹；Luciferase MKN-45細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲(chóng)熒光素酶。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定，培養(yǎng)時(shí)不需要添加維持?？捎米魑灮鹣x(chóng)熒光素酶活性檢測(cè)中的陽(yáng)性對(duì)照，也可用于活體動(dòng)物成像實(shí)驗(yàn)。該細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。MKN-45細(xì)胞是由S&middotAkiyama建立，源于一位35歲患有印戒細(xì)胞癌的女性的胃結(jié)。

物等級(jí)；1

細(xì)胞規(guī)格；1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)；無(wú)

保藏機(jī)構(gòu)；DSMZ; ACC-409

培養(yǎng)基；RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

體液脊髓過(guò)氧化酶（MPO）活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測(cè)試劑盒       小鼠膠原吡啶交聯(lián)(PYD)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠促腎上皮質(zhì)釋放(CRH)elisa檢測(cè)試劑盒       冰凍切片脂質(zhì)過(guò)氧化物異構(gòu)前列（ISOPROSTANE）熒光染色試劑盒

人腎上腺素（EPI）elisa檢測(cè)試劑盒       人CD44分子(CD44)elisa分析檢測(cè)試劑盒

小鼠L-乳酸脫氫酶A鏈(LDH-A)elisa檢測(cè)試劑盒       絲裂原活化蛋白激酶MAP4K5抗體 MAP4K5

Rabbit Anti-Acetyl-Histone H3 (Lys56) antibody       1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框180抗體 C1orf180

大鼠血纖蛋白原(Fbg)elisa檢測(cè)試劑盒       體液乳糖含量酶連續(xù)反應(yīng)光譜法定量檢測(cè)試劑盒

肽基脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶FKBP11抗體 FKBP11      PE標(biāo)記小鼠CD31單克隆抗體 mouse CD31/PE

2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框16抗體 C2orf16       肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白7抗體 CORO7血小板源性生長(zhǎng)因子受體β樣蛋白抗體 PDGFRL       蛋白酪氨酸磷酸酶相互作用蛋白51抗體 PTPIP51

人電壓門(mén)控鉀通道抗體(VGKC-ab)elisa生化檢測(cè)試劑盒       VGKC-abELISAKit

雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體 Ovalbumin       嗅覺(jué)受體家族5亞基1抗體 OR5T1

碘酪氨酸脫碘酶抗體 IYD       F-box蛋白45抗體 FBXO45

FITC標(biāo)記人CD64單克隆抗體 human CD64/FITC       磷酸化組蛋白去乙?；?span>6抗體 phospho-HDAC6 (Ser22)

貓眼綜合征染色體候選基因6抗體 CECR6       大鼠CD36elisa檢測(cè)試劑盒

人胃癌細(xì)胞帶熒光素酶；MKN-45/LUC小鼠雌二醇（E2）elisa檢測(cè)試劑盒       二代測(cè)序快速DNA建庫(kù)試劑盒for Illumina 24次

倉(cāng)鼠白介素1β(IL-1β)elisa生化檢測(cè)試劑盒       IL-1β ELISA Kit

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。