
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
NS-1
產(chǎn)品貨號(hào)
AXB10082
培養(yǎng)條件
氣相:95%空氣+5%二氧化碳;
生長特性
懸浮生長
細(xì)胞形態(tài)
母細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
小鼠
凍存條件
無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
組織來源
B細(xì)胞;漿細(xì)胞;骨髓瘤
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
商品詳情:
細(xì)胞別稱;P3/NSI/1-AG4-1;
P3/NS1/1-Ag4-1; P3/NS1/1-AG4-1; P3/NS1/Ag4-1; P3 NS1 Ag4/1; P3 NS1 Ag4;
P3.NS-1/1.Ag4.1; P3-NS1/1-Ag4-1; P3-NS1/1Ag 4.1; P3/NS-1; NS1/1-Ag4.1; NS1-1 Ag4.1;
NS-1-Ag4-1; NS1-Ag4/1; NS1-Ag 4/1; NS1-Ag4; P3X63NS1; NS-I/1; NS-1; NS1; GM035
種屬來源;小鼠
背景簡介;P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]是P3X63Ag8細(xì)胞的一個(gè)不分泌克隆。Kappa鏈合成了但不分泌,能抗0.1mM 8-氮雜鳥嘌呤,但不能在HAT培養(yǎng)基中生長。據(jù)報(bào)道,P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]細(xì)胞是缺失了3-酮類固醇還原酶活性的膽固醇營養(yǎng)缺陷型細(xì)胞。
組織來源;B細(xì)胞;漿細(xì)胞;骨髓瘤
生長特性;懸浮生長
細(xì)胞形態(tài);母細(xì)胞樣
細(xì)胞代數(shù);10代以內(nèi)
倍增時(shí)間;~24小時(shí)
細(xì)胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測;無
培養(yǎng)基;DMEM+10% FBS+PS
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件;無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
石蠟切片組織CDK4蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 小鼠3-α羥基類固醇脫氫酶(Akr1c9)elisa檢測試劑盒
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三磷酸腺苷依賴解旋酶DDX23抗體 DDX23
精子形成相關(guān)凋亡蛋白2抗體 TSARG2/SPATA4 有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體 MSK1
富含亮氨酸蛋白LRP130抗體 LRP130/LRPPRC G蛋白偶聯(lián)受體70抗體 GPR70
HER4抗體 ErbB4 鳥苷酸激酶GMK抗體 GUK1
趨化因子受體1抗體 CX3CR1 大鼠腎上腺總RNA
小鼠骨髓瘤細(xì)胞;NS-13-磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)試劑盒 大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)elisa檢測試劑盒
Malectin蛋白抗體 Malectin/MLEC