商品屬性：

細胞培養(yǎng)操作：

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。
b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情：

細胞別稱；M-1；小鼠腎集合管細胞（SV40轉化）

種屬來源；小鼠

組織來源；腎

生長特性；貼壁生長

細胞形態(tài)；上皮細胞樣

背景簡介；M-1細胞源于tg(SV40E)Bri7轉基因小鼠的正常腎組織，含SV40病毒的DNA序列，保留了皮質集合管的某些特性，如形態(tài)和CCD（皮質結合管）抗原。大多M-1細胞的克隆具有皮質集合管中閏細胞或主細胞的特征；5%~10%的細胞有閏細胞和主細胞的雙重表型。當該細胞在滲透性支持物上生長時，可形成具有負跨膜電位差的腔樣結構。

使用權限；A類

保藏單位；中國醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所細胞資源中心

細胞代數；10代以內

細胞規(guī)格；1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測；無

培養(yǎng)基；D/F12+10% FBS+PS

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存

Minibrain       1號染色體開放閱讀框21抗體

C1orf21       組織IKKβ激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

F-12營養(yǎng)培養(yǎng)基 500ml       Minibrain 抗體

土壤銨態(tài)氮測試盒       蛋白激酶N2抗體

CCL16/LEC       辣椒素受體5抗體  Anti-TRPV5

人廣譜細胞角蛋白(P-CK)elisa分析檢測試劑盒       大鼠環(huán)加氧酶1(COX-1)elisa分析檢測試劑盒

PKN2      巨噬細胞炎性蛋白16抗體

細胞色素b245輕鏈抗體  Anti-p22-phox/Cytochrome b245 Light Chain       卷曲螺旋結構域蛋白139抗體  Anti-PUS10/CCDC139Rabbit Anti-Human IgA / Cy5.5       EMC9蛋白抗體

雙特異性磷酸酶抗體12抗體       DUSP12

磷酸化酪氨酸蛋白激酶Fyn/步原基因抗體  Anti-phospho-SLK/FYN (Tyr530)       Cy5.5標記的兔抗人IgA

EMC9       人白介素18結合蛋白(IL-18BP)elisa分析檢測試劑盒

HumanIL-18BP檢測試劑盒       豬骨形成蛋白2(BMP-2)elisa分析檢測試劑盒

BMP-2檢測試劑盒       猴子α1微球蛋白(α1-MG)elisa分析檢測試劑盒

小鼠腎集合管細胞(SV40轉化)；M-1α1-MG ELISA Kit       人肺炎衣原體(Cpn)抗體(IgG)elisa分析檢測試劑盒

組蛋白去甲基化酶賴氨酸MINA抗體       MINA53

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。