
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠卵泡膜細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
卵巢組織
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
分類
大鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1638
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
大鼠卵泡膜細(xì)胞分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結(jié)構(gòu),而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機能。卵巢是位于兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成;髓質(zhì)位于中央,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,其中有許多血管、管和神經(jīng)。哺乳動物的卵巢內(nèi)卵泡的發(fā)育需要相關(guān)的調(diào)節(jié)才能完成,垂體(卵泡刺和黃體**素)使原始卵泡開始發(fā)育,其過程中還產(chǎn)生大量的雌。雌是卵巢的顆粒細(xì)胞和卵泡膜細(xì)胞在垂體的作用下協(xié)同合成的,卵泡膜細(xì)胞合成的雄透過基膜進(jìn)入顆粒細(xì)胞,并轉(zhuǎn)變?yōu)榇?。因此,卵泡膜?xì)胞在生殖***調(diào)節(jié)中占有關(guān)鍵的位置,了解其在病理及生理中的作用,對于與性有關(guān)的婦產(chǎn)科(如多囊卵巢綜合癥、卵巢癌等)的研究有著重要意義。在哺乳動物卵泡生長發(fā)育的過程中,卵母細(xì)胞由不斷增加的顆粒細(xì)胞層包裹。卵巢組織中的膜細(xì)胞作為卵泡的外層細(xì)胞可以維持卵泡結(jié)構(gòu)的完整性,參與構(gòu)成卵母細(xì)胞和顆粒細(xì)胞發(fā)育的微環(huán)境且為類固醇的**提供底物。在哺乳動物中調(diào)節(jié)膜細(xì)胞類固醇**的機制已見相關(guān)報道,但是有關(guān)卵泡膜細(xì)胞的聚集、生長和分化的研究尚不深入。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠卵泡膜細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠卵泡膜細(xì)胞經(jīng)3β-HSD熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品:
IFN-α1ELISAKit
鴨白介素8(IL-8/CXCL8)elisa分析檢測試劑盒
IL-8 ELISA Kit
人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)elisa分析檢測試劑盒
HumanALCAMELISAKit
磷酸化SH2結(jié)構(gòu)含磷酸肌醇SHIP1抗體 Anti-Phospho-SHIP1 (Tyr1020)
G蛋白結(jié)合蛋白RAB38抗體 Anti-RAB38
腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因H4抗體 Anti-NME4/nm23-H4
軟骨細(xì)胞蛋白39抗體 Anti-YKL39/CHI3L2
磷脂酸磷酸酶LPIN2抗體
Lipin 2
Bloom綜合征相關(guān)蛋白抗體
BLM
彈性蛋白酶抑制劑抗體 Anti-SKALP/Elafin
抵抗素樣分子α抗體 Anti-RELMa/RELM alpha
利鈉肽受體A抗體 Anti-Natriuretic Peptide Receptor A
鋅指蛋白568抗體 Anti-ZNF568
肌蛋白結(jié)合蛋白γ2抗體
SNTG2
糞生素氧化酶CPOX抗體
CPOX
跨膜蛋白SEMA5B抗體 Anti-SEMA5B/Semaphorin 5B
脂滴包被蛋白Perilipin-A抗體 Anti-Perilipin A
核苷酸內(nèi)焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗體 Anti-ENPP1/PC1/3
腫瘤壞死因子配體超家族成員4抗體 Anti-TNFSF4/CD252
羅丹明標(biāo)記小鼠IgG(型對照)
大鼠卵泡膜細(xì)胞Mouse IgG / RBITC
鋅指蛋白83抗體
Forkhead box protein J1; FOXJ-1; winged helix; FOXJ1; FKHL13; HFH-4; HFH4; MGC35202; forkhead box J1; Forkhead Homologue 4; Forkhead related protein FKHL13; Fox J1; Hepatocyte nuclear factor 3 forkhead homolog 4; HNF-3/forkhead homolog 4; FOXJ1_HUMAN.
大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞
鴨肝間質(zhì)細(xì)胞
CFPAC-1人胰腺癌細(xì)胞
ACHN人腎細(xì)胞癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。