細(xì)胞簡介：
大鼠胃平滑肌細(xì)胞分離自胃組織；胃柔軟，活體呈橘紅色。胃空虛時形成許多皺襞，充盈時變平坦。胃壁由粘膜、粘膜下膜、肌膜和漿膜四層構(gòu)成。粘膜上皮為柱狀上皮。上皮向粘膜深部下陷構(gòu)成大量腺體（胃底腺、賁門腺、幽門腺），它們的分泌物混合形成胃液，對食物進行化學(xué)性消化。粘膜在幽門處由于覆蓋幽門括約肌的表面而形成環(huán)狀的皺襞叫幽門瓣。胃肌膜由三層平滑肌構(gòu)成，外層縱形，中層環(huán)形，內(nèi)層斜行，其中環(huán)形肌，在幽門處特別增厚形成幽門括約肌。胃平滑肌細(xì)胞源自胃的平滑肌層，細(xì)胞通過緊密連接，進行同步性運動，完成肌肉的舒縮活動，以推動食物前進，完成對食物的機械性消化，并促進化學(xué)性消化和吸收。胃平滑肌具有肌組織的共同特性，如興奮、自律性、傳導(dǎo)性和收縮性，在離體后，置于適宜的環(huán)境內(nèi)，仍能進行良好的節(jié)律性運動，但其收縮很緩慢，節(jié)律性遠(yuǎn)不如心肌規(guī)則。胃平滑肌對電刺激較不敏感，但對于牽張、溫度和化學(xué)刺激則特別敏感，輕微的刺激常可引起強烈的收縮。胃平滑肌的這一特性是與它所處的生理環(huán)境分不開的，胃內(nèi)容物對平滑肌的牽張、溫度和化學(xué)刺激是引起內(nèi)容物推進或排空的自然刺激因素。
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組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號 |
用途 |
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胃組織 |
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
A01X1558 |
僅供科研研究實驗 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠胃平滑肌細(xì)胞采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的大鼠胃平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
實驗具體步驟：
（1）動物福利：小鼠麻醉犧牲/處死，或者斷頸處死；
（2）小鼠：可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min，然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈；
（3）取出心臟組織：用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔，取出心臟組織，置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中；
（4）組織：在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二，充分洗滌里邊的血液，/3次，每次5min；
（5）破碎組織：使用眼科鉗或者剪刀，將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊；（備注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min，
利于后期細(xì)胞從組織塊中爬出來，同時能夠消除部分結(jié)締組織等）
（6）種植組織塊：將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次，每次5min，然后使用完全培養(yǎng)基（含有1X雙抗）洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后，可以用細(xì)頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中（備注：破碎組織塊可能還含有液體，可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下，把液體）；種植完成后，可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時，然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜（也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜）；
（7）培養(yǎng)基培養(yǎng)：將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基，然后在恒溫潮濕細(xì)胞培養(yǎng)箱（37℃，5% CO2）培養(yǎng)48h后觀察單個細(xì)胞從組織塊中爬出情況，一般3-5 day能夠達到傳代的爬出效率；
（8）貼壁細(xì)胞傳代：當(dāng)單個細(xì)胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍，進行傳代，此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細(xì)胞，消化時間根據(jù)正常細(xì)胞消化時間即可，當(dāng)然可以在消化過程中不斷管擦爬出細(xì)胞的皺縮情況，一旦達到消化完成（皺縮細(xì)胞≥70%）即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細(xì)胞時候，一定要輕柔/緩慢，不能吹打到組織塊，如果組織塊掉下來，大概率是不會再貼壁成功啦。根據(jù)細(xì)胞數(shù)量種植到對應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中；
（9）鑒定：細(xì)胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細(xì)胞進行鑒定，鑒定辦法包括：RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細(xì)胞術(shù)等。實驗方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。其中，機械分散法的特點是簡便、快速，但對組織機械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差，適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品：
AQP-2ELISAKit
大鼠超敏熱休克蛋白70(HSP-70)elisa分析檢測試劑盒
HSP-70 ELISA Kit
人甲狀旁腺1受體(PTH1R)elisa分析檢測試劑盒
PTH1RELISAKit
腫瘤壞死因子配體超家族成員9抗體 Anti-TNFSF9/CD137L
RAS癌基因家族蛋白RAB40B抗體 Anti-RAB40B
活化T細(xì)胞核因子5蛋白抗體 Anti-NFAT5
氫離子轉(zhuǎn)運ATP合成酶A1抗體 Anti-V-ATPase A1
植物(擬南芥)超氧化物歧化酶[銅鋅]2,葉綠體(CSD2)elisa分析檢測試劑盒
chloroplastic(CSD2)ELISA kit
人雌酮(estrone,E1)elisa分析檢測試劑盒
E1ELISAkit
驢雌二醇(E2)elisa分析檢測試劑盒
冰凍切片游離毛地黃皂苷法（DIGITONIN）舒爾茨染色試劑盒
小鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)elisa檢測試劑盒
大鼠胞外銅鋅超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD/SOD3)elisa分析檢測試劑盒
非特異性細(xì)胞毒性受體蛋白1抗體
NCCRP1
5號染色體開放閱讀框45抗體
C5orf45
四分子交聯(lián)體12抗體（四旋蛋白） Anti-TSPAN12/NET-2
配對盒源基因4抗體 Anti-PAX4
口腔癌高表達的蛋白1抗體 Anti-ORAV1
磷酸化多配體聚糖4(Ser179)抗體 Anti-phospho-Syndecan 4(Ser179)
PE-CY5標(biāo)記的兔抗猴IgG H&L
大鼠胃平滑肌細(xì)胞Rabbit Anti-Monkey IgG H&L / PE-Cy5
神經(jīng)元突觸膜胞外分泌調(diào)節(jié)蛋白4抗體
EAA 2; EAA2; Excitatory amino acid receptor 2; GluRgamma2; Glutamate receptor; Glutamate receptor KA 2; Glutamate receptor KA-2; Glutamate receptor KA2; Glutamate receptor, ionotropic kainate 5 [Precursor]; Glutamate receptor, ionotropic, kainate 5 (gamma 2); Glutamate receptor, ionotropic, kainate 5; GRIK 2; GRIK 5; GRIK2; Grik5; GRIK5_HUMAN; iGlu5; ionotropic kainate 5; KA2; MGC118086.
大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞
小鼠心肌干細(xì)胞
HEK-293A人胚腎細(xì)胞
BICR 3人頭頸部鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞