培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠小腸黏膜上皮細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
小腸組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
上皮細胞樣
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1560
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
大鼠小腸黏膜上皮細胞分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi)，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的，因為食物經(jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后，基本上完成了消化過程，同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點是管壁有環(huán)形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切；構(gòu)成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和細胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能，其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力，促使食物向下運動。腸黏膜上皮細胞是機體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的道防線。因此，腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞，在黏膜反應的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定黏膜反應的發(fā)生、性質(zhì)和強度。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠小腸黏膜上皮細胞采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的大鼠小腸黏膜上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-18熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
NF-κBELISAKit
猴分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)elisa分析檢測試劑盒
SFRP1 ELISA kit
人二氫嘧啶酶樣3(DPYSL3)elisa分析檢測試劑盒
DPYSL3ELISAKit
線粒體促凋亡蛋白抗體 Anti-Smac/DIABLO
RAS癌基因相關(guān)蛋白RAB17抗體 Anti-Rab17
神經(jīng)元衍生孤兒受體1抗體 Anti-NOR1
乙型肝炎X蛋白HBX抗體 Anti-X protein/HB-X (middle)
果蠅inaD蛋白抗體
inaD
1號染色體開放閱讀框98抗體
C1orf98
GSK-3ALPHA蛋白表達西方雜交分析試劑盒
牛胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP-5)elisa分析檢測試劑盒
乳酸含量試劑盒
小鼠巨嗜細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)elisa檢測試劑盒
前列環(huán)素受體抗體
Prostaglandin I2 Receptor
干擾素alpha 7蛋白抗體
IFNA7
結(jié)腸癌抗原16抗體 Anti-UTP14A/SDCCAG16
妊娠相關(guān)血漿蛋白A2抗體 Anti-PAPP A2
棕櫚酰蛋白水解酶2抗體 Anti-PPT2
硫酸酯酶2蛋白抗體 Anti-Sulfatase 2
PE-Cy3標記的羊抗人IgM
大鼠小腸黏膜上皮細胞Goat Anti-Human IgM / PE-Cy3
原癌基因FRAT1抗體
CRMP2 (phospho T514 + S518); CRMP2 (phospho T514+S518); CRMP-2(phospho Thr514+S518); p-CRMP2(Thr514+S518); CRMP2/Dpysl2(DRP 2; Collapsin response mediator protein 2; Collapsin response mediator protein hCRMP 2; CRAM; CRMP 2; DHPRP 2; DHPRP2; Dihydr pyrimidinase 2; Dihydropyrimidinase 2; Dihydropyrimidinase like 2; Dihydropyrimidinase like 2 long form;Dihydropyrimidinase related protein 2; DPYL 2; DPYL2; DPYSL 2; DPYSL2; DRP 2; DRP2; Musunc 33; Musunc33; N2A3; TOAD 64; TOAD64; ULIP 2 protein; Ulip2.
產(chǎn)品類型；磷酸化抗體
大鼠小腸平滑肌細胞
小鼠心房心肌細胞
HEL人紅白細胞白血病細胞
BICR 78人頭頸部鱗狀細胞癌細胞
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。