產(chǎn)品名稱
人骨髓間充質(zhì)干細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
骨髓
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
成纖維細胞樣
分類
人原代細胞
貨號
A01X1412
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
人骨髓間充質(zhì)干細胞（BMSC）分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能**紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括、病毒等；某些細胞能**抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)系統(tǒng)內(nèi)存在的骨髓間充質(zhì)干細胞是一種除造血干細胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞，可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化，因此可以作為組織工程中的種子細胞。在骨髓中，BMSC占骨髓有核細胞總數(shù)的0.001%-0.1%，含量極低。骨髓間充質(zhì)干細胞的體外培養(yǎng)條件要求較高，在培養(yǎng)過程中，受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響。
方法簡介：
公司實驗室分離的人骨髓間充質(zhì)干細胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人骨髓間充質(zhì)干細胞經(jīng)CD29、CD90熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
IL-15ELISAKit
大鼠鈣調(diào)磷酸酶(CaN)elisa分析檢測試劑盒
CaN ELISA Kit
豚鼠白介素22(IL-22)elisa分析檢測試劑盒
IL-22ELISAKit
牛纖維蛋白原(Fb)elisa分析檢測試劑盒
TUBULIN蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒
小鼠白介素10(IL-10)elisa檢測試劑盒
倉鼠極低密度脂蛋白(VLDL)elisa分析檢測試劑盒
倉鼠促卵泡素(FSH)elisa分析檢測試劑盒
FSH ELISA kit
人凋亡相關(guān)蛋白激酶(DAPK)elisa分析檢測試劑盒
HumanDAPKELISAKit
石蠟切片黑色素去色試劑盒
人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)elisa分析檢測試劑盒
大鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)elisa檢測試劑盒
小鼠磷酸酶張力蛋白源物(PTEN)elisa檢測試劑盒
MSI2蛋白抗體
MSI2
20號染色體開放閱讀框74抗體
C20orf74
跨膜蛋白4超家族成員3抗體 Anti-TM4SF3
維甲酸相關(guān)孤兒受體γ抗體 Anti-RORG/ROR gamma
神經(jīng)元特異性烯醇化酶/γ 烯醇化酶抗體 Anti-NSE
血清學定義結(jié)腸抗原1抗體 Anti-SDCG1
PE標記的兔抗雞IgM
人骨髓間充質(zhì)干細胞Rabbit Anti-Chicken IgM / PE
磷酸化細胞周期檢控Rad17蛋白抗體
CENP 34; Centromere protein 34; Ras association (RalGDS/AF 6) domain family 2; Ras association (RalGDS/AF-6) domain family member 2; Ras association domain containing protein 2; Ras association domain-containing protein 2; RASF2_HUMAN; RASFADIN; RASSF2; RP4-599I11.1.
人冠狀動脈內(nèi)皮細胞
小鼠腎集合管上皮細胞
KGN人卵巢顆粒細胞瘤細胞
CBRH7919大鼠肝癌細胞