產(chǎn)品名稱(chēng)
人卵巢成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
卵巢組織
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
分類(lèi)
人原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1393
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人卵巢成纖維細(xì)胞分離自卵巢組織；卵巢是雌性動(dòng)物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類(lèi)固醇。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側(cè)發(fā)育（右側(cè)已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動(dòng)物有兩個(gè)卵巢，但是部分魚(yú)類(lèi)的兩個(gè)卵巢融合為單個(gè)結(jié)構(gòu)，而所有鳥(niǎo)類(lèi)只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于兩側(cè)的一對(duì)卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周?chē)糠?，主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成；髓質(zhì)位于中央，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，其中有許多血管、管和神經(jīng)。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的卵巢成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。卵巢成纖維細(xì)胞大多分布于卵巢表面，其主要特點(diǎn)和功能：①成纖維細(xì)胞在體外易于培養(yǎng)；②卵巢損傷后，成纖維細(xì)胞能修復(fù)和重塑卵巢；③能在卵巢炎癥時(shí)有效控制炎癥擴(kuò)散。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢成纖維細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
牛Ⅲ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)elisa檢測(cè)試劑盒
整合素α9抗體
Integrin alpha 9
膜粘連蛋白9抗體
Annexin A9
PDGF-A蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
γ氨基丁酸(GABA)elisa分析檢測(cè)試劑盒
北方雜交完全試劑盒
小鼠骨涎蛋白(BSP)elisa檢測(cè)試劑盒
MRGPRH蛋白抗體
MRGPRH
20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框144抗體
C20ORF144
轉(zhuǎn)導(dǎo)素β1X連鎖蛋白抗體 Anti-TBL1X
結(jié)合蛋白4抗體 Anti-RBP4
核孔蛋白50抗體 Anti-NUP50
滑膜肉瘤X斷點(diǎn)蛋白5抗體 Anti-SSX5
泛素蛋白連接酶G2抗體
Ube2G2
防御素β-113/β-defensin 113抗體
DEFB113
絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體 Anti-SEK1/MKK4/MAP2K4
磷酸化一氧化氮合成酶3（內(nèi)皮型）抗體 Anti-Phospho-eNOS (Thr495)
磷酸化蛋白激酶C mu型抗體 Anti-phospho-PRKD1(Tyr463)
味覺(jué)受體蛋白家族2亞基60抗體 Anti-T2R60
大鼠甘油三酯(TG)elisa分析檢測(cè)試劑盒
人卵巢成纖維細(xì)胞TG ELISA Kit
豚鼠端粒酶(TE)elisa分析檢測(cè)試劑盒
Interleukin-8; Interleukin 8; Interleukin8;(Ala-IL-8)77; (Ser-IL-8)72; 3 10C; 310C; AMCF 1; AMCF1; b ENAP; Bbeta thromboglobulin like protein; Beta thromboglobulin like protein; C-X-C motif chemokine 8; CXC chemokine ligand 8; CXCL 8; CXCL8; Emoctakin; GCP 1; GCP-1; GCP/IL-8 protein I; GCP/IL-8 protein II; GCP/IL-8 protein III; GCP/IL-8 protein IV; GCP/IL-8 protein V; GCP/IL-8 protein VI; GCP1; Granulocyte chemotactic protein 1; IL 8; IL-8; IL-8(1-77); IL-8(9-77); IL8; IL8/NAP1 form I; IL8/NAP1 form II; IL8/NAP1 form III; IL8/NAP1 form IV; IL8/NAP1 form V; IL8/NAP1 form VI; IL8_HUMAN; Inteleukin 8; Interleukin8; K 60; K60; LECT; LUCT; Lymphocyte derived neutrophil activating factor; Lymphocyte-derived neutrophil-activating factor; LYNAP; MDNCF; MDNCF-b; MDNCF-c; MONAP; Monocyte derived neutrophil activating peptide; Monocyte derived neutrophil activating protein; Monocyte derived neutrophil chemotactic factor; Monocyte-derived neutrophil chemotactic factor; Monocyte-derived neutrophil-activating peptide; NAF; NAP 1; NAP-1; NAP1; Neutrophil activating factor; Neutrophil activating peptide 1; Neutrophil activating protein 1; Neutrophil-activating factor; Neutrophil-activating protein 1; Protein 3 10C; Protein 3-10C; SCYB 8; SCYB8; Small inducible cytokine subfamily B member 8; T cell chemotactic factor; T-cell chemotactic factor; TSG 1; TSG1.
人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞
小鼠三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞
LN229人膠質(zhì)瘤細(xì)胞
CFSC-8B大鼠肝星形細(xì)胞