
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
卵巢組織
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
內(nèi)皮細(xì)胞樣
分類
人原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1390
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自卵巢組織;卵巢是雌性動(dòng)物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動(dòng)物有兩個(gè)卵巢,但是部分魚類的兩個(gè)卵巢融合為單個(gè)結(jié)構(gòu),而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于兩側(cè)的一對(duì)卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成;髓質(zhì)位于中央,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,其中有許多血管、管和神經(jīng)。微血管又稱。分布于各種組織和細(xì)胞間的微細(xì)的血管。介于微動(dòng)脈和微靜脈之間。平均直徑7~9微米,數(shù)量極多,成網(wǎng)狀分布。管壁由一層內(nèi)皮細(xì)胞及一薄層基膜組成,厚約0.5微米?;ね饷嬗斜咏Y(jié)締組織,其中有纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和周細(xì)胞等。細(xì)的微血管由一個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成管腔,較粗的微血管由2~3個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成。分布于肌肉組織、神經(jīng)組織和結(jié)締組織中的微血管,內(nèi)皮細(xì)胞間為縫隙連接(縫隙寬150埃),稱連續(xù)微血管。血管內(nèi)皮細(xì)胞在器官和組織的結(jié)構(gòu)和功能上起著非常重要的作用。并與多種的發(fā)生與發(fā)展有關(guān)。近年來血管內(nèi)皮細(xì)胞在炎癥、休克等一系列病理生理改變中的重要性愈來愈受到人們的重視。研究發(fā)現(xiàn),不同來源的內(nèi)皮細(xì)胞在生物學(xué)特征、結(jié)構(gòu)和功能等方面均存在一定差別,而同是微血管內(nèi)皮細(xì)胞,它們又存在器官和組織的特異性。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品:
VB12ELISAKit
大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)elisa分析檢測(cè)試劑盒
Rat rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit
山羊白介素12(IL-12/P40)elisa分析檢測(cè)試劑盒
IL-12/P40ELISAKIT
大鼠PDGFβ基因甲基化檢測(cè)試劑盒
γ干擾素(IFNG)elisa分析檢測(cè)試劑盒
BCA 蛋白定量試劑盒500T
小鼠黑色素瘤抗原家族A1(MAGEA1)elisa檢測(cè)試劑盒
孕/孕酮(PROG)elisa分析檢測(cè)試劑盒
PROG ELISA kit
人膽酸(Cholic acid)elisa分析檢測(cè)試劑盒
HumanCholicacidELISAKit
DNA上樣緩沖液6x 5ml
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)elisa檢測(cè)試劑盒
牛丙二酸單酰輔酶A(malonyl CoA)elisa檢測(cè)試劑盒
組織單胺氧化酶(MAO)總活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒
肌球蛋白重鏈9抗體
MYH9
3號(hào)染色體開放閱讀框20抗體
C3orf20
Tudor結(jié)構(gòu)域蛋白TDRD3抗體 Anti-TDRD3
G蛋白偶聯(lián)受體RAB23抗體 Anti-RAB23
分化相關(guān)基因NDRG1抗體 Anti-NDRG1/Cap43
干細(xì)胞生長因子抗體 Anti-SCF
PE-Cy7標(biāo)記的兔抗人IgM
人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞Rabbit Anti-Human IgM / PE-Cy7
豬藍(lán)耳病病毒抗體
C7orf12; CAS1 domain-containing protein 1; Casd1; CASD1_HUMAN; FLJ21213; FLJ21879; FLJ41901; NBLA04196.
人脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞
小鼠腮腺細(xì)胞
LNCaP clone FGC人前列腺癌細(xì)胞
ChaGo-K-1 肺支氣管癌
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。