培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人軟骨細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
軟骨組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
梭形、多角形
分類
人原代細胞
貨號
A01X1419
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2~3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
人軟骨細胞分離自軟骨組織；軟骨組織由軟骨細胞、基質(zhì)及纖維構成。軟骨組織再生能力強，這些增生的幼稚細胞形似纖維母細胞，以后逐漸變?yōu)檐浌悄讣毎?，并形成軟骨基質(zhì)，細胞被埋在軟骨陷窩內(nèi)而變?yōu)殪o止的軟骨細胞。根據(jù)軟骨組織內(nèi)所含纖維成分的不同，可將軟骨分為透明軟骨、彈性軟骨和纖維軟骨三種，其中以透明軟骨的分布較廣，結構也較典型。軟骨細胞（chondrocyte）位于軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的軟骨細胞位于軟骨組織的表層，單個分布，體積較小，呈橢圓形，長軸與軟骨表面平行，越向深層的軟骨細胞體積之間增大呈圓形，細胞核圓形或卵圓形，染色淺，細胞質(zhì)弱嗜堿性，常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內(nèi)，這些軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成，稱為同源細胞群。電鏡下，軟骨細胞有突起和皺褶，細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中，軟骨細胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的軟骨細胞對于研究其生理功能、作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介：
公司實驗室分離的人軟骨細胞采用膠原酶-中性蛋白酶聯(lián)合消化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人軟骨細胞經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
石蠟切片組織INSULIN 蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
魚γ干擾素(IFN-γ)elisa檢測試劑盒
大鼠前列腺素E1(PGE1)elisa檢測試劑盒
硝酸鹽肉湯
兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)elisa檢測試劑盒
總蛋白提取試劑盒100T
冰凍切片膠原纖維（MASSON）染色試劑盒
小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體δ(PPARδ)elisa檢測試劑盒
大鼠白介素2受體α(IL2Rα)elisa檢測試劑盒
E3連接酶蛋白ARIH2抗體 ARIH2
ETV3L蛋白抗體 ETV3L
磷酸化驅動蛋白樣蛋白1抗體 phospho-Eg5 (Thr926)
磷酸化細胞間粘附分子1（CD54）抗體 phospho-ICAM1 (Tyr512)
超氧化物歧化酶2重組兔單克隆抗體 SOD2
脆性X相關蛋白樣2抗體 FXR2
鋅指蛋白192抗體 ZFP192
鋅指蛋白567抗體 ZNF567
PE-Cy5標記小鼠CD86單克隆抗體 mouse CD86/PE-Cy5
PE標記人CD30單克隆抗體 human CD30/PE
腎功能相關抗原1抗體 KAAG1
視錐視桿相關蛋白CORD2抗體 CORD2/OTX3
紅細胞膜條帶4.1蛋白抗體 EPB41
環(huán)指蛋白8抗體 RNF8
轉鐵蛋白（內(nèi)參）單克隆抗體 Transferrin(Serum Loading Control)
14號染色體開放閱讀框146抗體 LRFN5/C14orf146
人腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)elisa檢測試劑盒
人軟骨細胞組織肌酸激酶（CK）總活性比色法定量檢測試劑盒
小鼠凝血因子VIIIa輕鏈(F8aLC)elisa檢測試劑盒
TEN3_HUMAN; Teneurin-3; Ten-3; Protein Odd Oz/ten-m homolog 3; Tenascin-M3; Ten-m3; Teneurin transmembrane protein 3; KIAA1455; ODZ3; TNM3;
人視網(wǎng)膜色素上皮細胞
小鼠胚胎成纖維細胞
MDA-MB-468人乳腺癌細胞
COLO 829人黑素瘤細胞
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。