產(chǎn)品名稱
人腎小管上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
腎組織
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
分類
人原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1328
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人腎小管上皮細(xì)胞分離自腎組織；腎臟是機(jī)體的重要器官，它的基本功能是**尿液，借以體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有功能，**腎素、促紅細(xì)胞**素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等，又為機(jī)體部分的降解場(chǎng)所和腎外的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進(jìn)行。腎小管是機(jī)體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細(xì)長(zhǎng)上皮性小管，具有重吸收（reabsorption）和排泌作用。腎小管按不同的形態(tài)結(jié)構(gòu)、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和遠(yuǎn)端小管三部分；近端小管可分為直部和曲部，曲部也稱為近曲小管，位于皮質(zhì)迷路內(nèi)，于腎小體附近高度蟠曲；遠(yuǎn)端小管曲部也稱為遠(yuǎn)曲小管，位于皮質(zhì)迷路內(nèi)。腎小管上皮細(xì)胞是腎小管外面的一層細(xì)胞，腎小管上皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)是研究腎臟的一項(xiàng)重要技術(shù)，目前該細(xì)胞分離方法有酶分離法、化學(xué)分離法篩網(wǎng)分離法、顯微解剖分離法、流式細(xì)胞儀分離法等。腎小管上皮細(xì)胞主要功能：①腎小管上皮細(xì)胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸；②排泌非營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入終尿；③細(xì)胞能分泌炎癥介質(zhì)如細(xì)胞因子和趨化因子，通過(guò)產(chǎn)生IL-8或直接趨化白細(xì)胞參與急性炎癥反應(yīng)；④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達(dá)IL-2R和MHC-Ⅱ類抗原，這說(shuō)明腎小管上皮細(xì)胞參與腎損傷的發(fā)生。隨著對(duì)腎間質(zhì)纖維化機(jī)制研究的日漸加深，腎小管上皮細(xì)胞（RTECs）在其中的作用日益被人們重視。因此，提供良好的腎小管上皮細(xì)胞模型，在腎小管間質(zhì)的發(fā)病機(jī)制和篩選的研究中是非常重要的。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腎小管上皮細(xì)胞 采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腎小管上皮細(xì)胞 經(jīng)PCK熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠Discoidin域受體家族成員1(DDR1)elisa檢測(cè)試劑盒
豬乙腦病毒包膜蛋白抗體
JEV E
碳酸酐酶4抗體
CAIV/Carbonic Anhydrase IV
丙二醛（MDA）試劑盒
冰凍切片熒光顯微鏡間接檢測(cè)試劑盒（含熒光二抗）
小鼠大動(dòng)脈平滑肌肌動(dòng)蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠FK506結(jié)合蛋白12-雷帕霉素相關(guān)蛋白1(FRAP1)elisa檢測(cè)試劑盒
肌微管素相關(guān)蛋白6抗體
MTMR6
FAM124B蛋白抗體
FAM124B
腫瘤蛋白p53誘導(dǎo)蛋白8 Anti-TP53I8/EI24
磷酸化磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體 Anti-phospho-RPS6KA1(Thr348)
一氧化氮合成酶-2抗體（誘導(dǎo)型） Anti-iNOS
細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體 Anti-Smad1
Z DNA結(jié)合蛋白抗體
Z DNA binding protein
NDUFAF7
磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體 Anti-Phospho-Stat2 (Tyr690)
神經(jīng)絲蛋白抗體 Anti-Neuronal thread protein AD7c-NTP
Ras蛋白腦組織源類似物RHEB蛋白抗體 Anti-RHEB
轉(zhuǎn)錄因子DP3抗體（相關(guān)抗原661） Anti-TFDP3
大鼠防御素5 elisa分析檢測(cè)試劑盒
人腎小管上皮細(xì)胞Rat defensin-5 ELISA kit
山羊還原型谷胱甘肽(GSH)elisa分析檢測(cè)試劑盒
AU020183; AW146150; Block of proliferation 1; Block of proliferation 1 protein; Bop1; Bop1 block of proliferation 1; BOP1_HUMAN; D18861; Erb1p; Kiaa0124; MGC109114; mKIAA0124; Ribosome biogenesis protein BOP1.
人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞
小鼠膀胱間質(zhì)細(xì)胞
MG63人骨肉瘤細(xì)胞
COLO320 HSR人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞