產(chǎn)品名稱
人食管平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
食管組織
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
分類
人原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1284
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人食管平滑肌細(xì)胞分離自食管組織；食管可分為頸段、胸段和腹段，脊椎動(dòng)物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi)，胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連，腹段很短與胃相連。哺乳動(dòng)物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，肌層上1/3段為骨骼肌，下1/3為平滑肌，中段為骨骼肌和平滑肌混合組成。其中，肌纖維的排列方式分為內(nèi)環(huán)形和外縱形兩層。食管的蠕動(dòng)是由食管平滑肌收縮嚴(yán)格控制，食管還有括約肌，位于環(huán)狀軟骨水平的，稱為食管上括約肌；位于食管下端，一部分在膈上，穿過膈孔，另一部分在膈下的高壓帶，稱為食管下括約肌。食管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人食管平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人食管平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
MousesolubleterminalcomplementcomplexSC5b9ELISAKit
大鼠ERp57 elisa分析檢測(cè)試劑盒
Rat ERp57 Elisa kit
人谷氨酸-半胱氨酸連接酶調(diào)節(jié)亞基(GCLM)elisa分析檢測(cè)試劑盒
HumanGCLMELISAKit
降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)elisa分析檢測(cè)試劑盒
冰凍切片脂肪組織染色試劑盒
小鼠含TCP1伴侶蛋白亞基2(CCT2)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素2可溶性受體β鏈(sIL-2Rβ)elisa檢測(cè)試劑盒
乙酰化組蛋白H2B K5抗體
Histone H2B (acetyl K5)
細(xì)胞凋亡增強(qiáng)核酸酶抗體
AEN
大鼠活化素A(ACV-A)elisa檢測(cè)試劑盒
土壤蛋白提取試劑盒50T
人孤腓肽(OFQ/N)elisa分析檢測(cè)試劑盒
人體RUNX3基因重組表達(dá)載體（pcDNA-RUNX3）
p53誘導(dǎo)核蛋白1抗體
p53 DINP1
HEPHL1蛋白抗體
HEPHL1
端粒體復(fù)制結(jié)合因子1抗體 Anti-TRBF1/TRF1
脯氨酰羧肽酶抗體 Anti-PRCP
B細(xì)胞誘導(dǎo)成熟蛋白1抗體 Anti-PRDM1/Blimp1
STAC1蛋白抗體 Anti-STAC
堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的小鼠抗羊IgG H&L
人食管平滑肌細(xì)胞Mouse Anti-Goat IgG H&L / AP
FBXW12蛋白抗體
DKFZp586H0623; FLJ00205; FLJ11715; GalNAc T10; GalNAc transferase 10; GalNAc-T10; GalNAcT10; GALNT10; GLT10_HUMAN; Polypeptide GalNAc transferase 10; Polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferase 10; pp GalNAc T10; pp GaNTase 10; pp-GaNTase 10; ppGalNAcT10; ppGaNTase 10; Protein UDP acetylgalactosaminyltransferase 10; Protein-UDP acetylgalactosaminyltransferase 10; UDP GalNAc:polypeptide N acetylgalactosaminyltransferase 10; UDP N acetyl alpha D galactosamine:polypeptide N acetylgalactosaminyltransferase 10; UDP-GalNAc:polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferase 10.
人食管上皮細(xì)胞
小鼠腦血管成纖維細(xì)胞
MIA-PACA-2人胰腺癌細(xì)胞
COR-L23/CPR人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞