培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長(zhǎng)。如果無污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
胎盤組織
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
分類
人原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1492
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體內(nèi)膜聯(lián)合長(zhǎng)成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營(yíng)養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的，是一個(gè)重要的器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長(zhǎng)出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cell，MSC）是一種多能干細(xì)胞，是具有自我復(fù)制能力的多潛能細(xì)胞。在一定條件下，它可以分化成多種功能細(xì)胞像APSC多能細(xì)胞。在胚胎發(fā)育中來源于中胚層。在機(jī)體正常的組織損傷修復(fù)過程中，MSC是一種重要的參與組織再生的細(xì)胞庫。在組織損傷引起的特殊信號(hào)作用下，MSC遷移到受損部位，在局部聚集增殖，依據(jù)不同的損傷信號(hào)沿著不同途徑分化。MSC易于分離擴(kuò)增，體外倍增能力旺盛，能保持其多向分化能力。因此，MSC是一種實(shí)用的組織修復(fù)種子細(xì)胞。相較于其他干細(xì)胞，胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞具有來源方便，細(xì)胞數(shù)量充足，易于分離、培養(yǎng)、擴(kuò)增和純化，傳代擴(kuò)增多代后仍具有干細(xì)胞特性。胎盤是干細(xì)胞的佳來源。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)CD90熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
MouseopiorphinELISAkit
小尾寒羊阿黑皮素原(POMC)elisa分析檢測(cè)試劑盒
POMC ELISA kit
人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)elisa分析檢測(cè)試劑盒
HumanIL-2sRβELISAKit
大鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM1)elisa檢測(cè)試劑盒
冰凍切片組織CDK3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
小鼠25羥基維生素D3(25 HVD3)elisa檢測(cè)試劑盒
組化超敏型HRP－TMB底物顯色試劑盒
蛛受體3抗體
LPHN3
細(xì)胞質(zhì)FMR1相關(guān)蛋白抗體
CYFIP1
絲氨酸消旋酶 Anti-Serine racemase
RH血型C糖蛋白抗體 Anti-RHCG
神經(jīng)細(xì)胞粘附蛋白NGN抗體 Anti-NGN/Neogenin
鋅指蛋白342抗體 Anti-ZNF342/ZNF296
精子發(fā)生相關(guān)蛋白24抗體
SPATA24
溶血磷脂酰?；D(zhuǎn)移酶2抗體
MBOAT2
細(xì)胞分化蛋白SEP1抗體 Anti-SEPT1
蛋白酶體PSMβ7抗體 Anti-Proteasome 20S beta 7
P73腫瘤抑制基因抗體 Anti-P73 protein
細(xì)胞粘合素(固生蛋白)抗體 Anti-Tenascin C/Tn-C
Alexa Fluor 680標(biāo)記羊IgG
人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞Goat IgG / AF680
G蛋白偶聯(lián)受體LGR7蛋白抗體
Arylsulfatase B; ArylsulfataseB; ASB; G4S; MPS6; N acetylgalactosamine 4 sulfatase.
人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞
小鼠毛囊角質(zhì)細(xì)胞
MV3人黑色素瘤細(xì)胞
COS-7非洲綠猴腎細(xì)胞 SV40轉(zhuǎn)化
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。