
產(chǎn)品名稱
人外周血巨噬細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
外周血
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
巨噬細(xì)胞樣
分類
人原代細(xì)胞
貨號
A01X1460
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、M-CSF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):巨噬細(xì)胞樣
傳代特性:屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液:利多卡因(12mM)
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
人外周血巨噬細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介:
人外周血巨噬細(xì)胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。巨噬細(xì)胞屬細(xì)胞,有多種功能,是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞和分子學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞較易獲得,便于培養(yǎng),并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,源自單核細(xì)胞,而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞,在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活球或其他細(xì)胞,令其對病原體作出反應(yīng)。
方法簡介:
實驗室分離的人外周血巨噬細(xì)胞采用取外周血、通過密度梯度離心法、差速貼壁、細(xì)胞因子誘導(dǎo)法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的人外周血巨噬細(xì)胞經(jīng)CD68熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

公司正在出售的產(chǎn)品:
水中隱孢子蟲(Cryptosporidium)基因熒光定量檢測試劑盒
KIAA2018蛋白抗體
KIAA2018
乳腺腺癌標(biāo)志物CHMP2A抗體
CHMP2A
大鼠脂酰輔酶A合成酶(ACS)elisa檢測試劑盒
冰凍切片組織JNK/SAPK蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒
小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)elisa檢測試劑盒
倉鼠白介素3(IL-3)elisa分析檢測試劑盒
核受體共激活因子NCOA62抗體
NCOA62
細(xì)胞外基質(zhì)蛋白FRAS1抗體
FRAS1
轉(zhuǎn)錄因子9抗體 Anti-TCF9/GCF
孕受體膜相關(guān)元件抗體 Anti-PGRMC
纖維細(xì)胞源性蛋白 Anti-Otoraplin/OTOR/Fibrocyte derived protein
細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-2抗體 Anti-Smad2
β氨基己糖苷酶A抗體
HEXA
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2抗體
NRG2
抑制蛋白Viperin抗體 Anti-Viperin/RSAD2
神經(jīng)生長因子受體抗體 Anti-NGFR/p75NTR
環(huán)指蛋白169抗體 Anti-RNF169
味覺受體蛋白家族2亞基9抗體 Anti-TAS2R9
大鼠層粘蛋白α1(LAMA1)elisa分析檢測試劑盒
人外周血巨噬細(xì)胞LAMA1 ELISA Kit
人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)elisa分析檢測試劑盒
FLJ40446; IFNRP; IFRD 2; IFRD2; IFRD2_HUMAN; Interferon related developmental regulator 2; Interferon related protein; Interferon-related developmental regulator 2; Protein SKMC15; SKMc 15; SKMc15; SKMC15 protein; SM 15; SM15; IFRD2_HUMAN.
人胃黏膜上皮細(xì)胞
小鼠脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞
NCCIT人畸胎癌細(xì)胞
CRFK(貓腎細(xì)胞)