培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人心臟微血管內(nèi)皮細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
心臟組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
內(nèi)皮細胞樣
分類
人原代細胞
貨號
A01X1269
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
人心臟微血管內(nèi)皮細胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內(nèi)皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用，在心臟血管的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義。近年來大量研究表明，心肌微血管內(nèi)皮細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能，也是諸多**、炎癥因子及病毒等重要靶位，其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用。
方法簡介：
公司實驗室分離的人心臟微血管內(nèi)皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人心臟微血管內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
植物磷脂酶D alpha（Phospholipase D alpha）活性熒光定量檢測試劑盒
冰凍切片半胱12（CASPASE-12）活性原位熒光染色檢測試劑盒
犬γ干擾素(IFN-γ)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠11-β-羥基類固醇脫氫酶1(HSD11β1)elisa檢測試劑盒
小鼠可溶性Toll樣受體4(sTLR4)elisa分析檢測試劑盒
人1,25OH2D3elisa檢測試劑盒
丙二醛（MDA）終點比色法定量檢測試劑盒
小鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)elisa分析檢測試劑盒
大鼠白介素23（IL－23）elisa檢測試劑盒
造血細胞信號轉導蛋白抗體 HCST
整合素αVβ5抗體 Integrin Alpha V + Beta 5
富含亮氨酸重復家庭蛋白1抗體 LRCH1
鈣粘蛋白28抗體 Cadherin28
HLA-DR重組兔單克隆抗體 HLA-DR
KBP蛋白抗體 KBP
葡萄糖苷酶2β/Glucosidase IIβ抗體 Glucosidase 2 subunit beta
巰基氧化酶1抗體 QSOX1
APC標記人CD10單克隆抗體 human CD10/APC
ATP依賴RNA解旋酶DDX54抗體 DDX54
肽/天蠶素抗體 Cecropin-A
快速骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體 MYLPF
UL16結合蛋白2抗體 ULBP2
α1酸性糖蛋白1/類粘蛋白1重組鼠單克隆抗體 Alpha-1-acid glycoprotein 1
無胸腺癥相關蛋白DGCR6/迪格奧爾格綜合征關鍵基因6抗體 DGCR6
細胞色素P450 F2抗體 CYP4F2
小鼠白介素29(IL-29)elisa檢測試劑盒
人心臟微血管內(nèi)皮細胞磷酸二酯酶（Phosphodiesterase；PDE）
飲料污染ATP生物發(fā)光法定量檢測試劑盒
amyloid beta (A4) precursor like protein 2; Amyloid like protein 2; amyloid precursor protein homolog HSD2; Amyloid protein homolog; Amyloid-like protein 2; APLP-2; Aplp2; APLP2_HUMAN; APPH; APPL2; CDEBP; CDEI box binding protein; CDEI box-binding protein.
人牙髓干細胞
小鼠卵巢表面上皮細胞
NCI-H1650[H1650]（MKN-1）人肺支氣管癌細胞
CTLA4 IG-24中國倉鼠卵巢細胞
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。