產(chǎn)品名稱
兔氣管平滑肌細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
氣管
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
成纖維細胞樣
分類
兔原代細胞
貨號
A01X2012
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
兔氣管平滑肌細胞分離自氣管組織；氣管（Trachea），呼吸器官的一部分；為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣，與環(huán)狀軟骨相連；向下至第四、五胸椎體（相當胸骨角平面）交界處，分左、右主支氣管，分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構(gòu)成，有彈性，軟骨為“C”字形的軟骨環(huán)，缺口向后，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接，保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜，表面覆蓋纖毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒，纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出，以凈化吸入的氣體。氣管平滑肌是氣管的重要結(jié)構(gòu)組成之一，在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用；能夠保持氣道張力，維持氣道管狀形態(tài)，從而有利于氣體流通，保持肺部通氣。氣管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。氣管平滑肌細胞的異常是呼吸道的重要病理特征之一，其增生、肥大是氣道重塑的關(guān)鍵。
方法簡介：
公司實驗室分離的兔氣管平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的兔氣管平滑肌細胞經(jīng)α-SMA熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
MouseCXCL1ELISAkit
艾滋病病毒p55/p17抗體
HIV1 p55 + p17
溶血磷脂酸酰基轉(zhuǎn)移酶β抗體
Agpat2
小鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)elisa檢測試劑盒
大鼠白介素1β(IL－1β)elisa檢測試劑盒
羥脯（HYP）高效液相色譜定量檢測試劑盒
人α2抗纖溶酶(α2-AP)elisa分析檢測試劑盒
有絲分裂抑制缺陷蛋白1抗體
MAD1
細胞分化相關(guān)蛋白13抗體
DAP13
精氨酸結(jié)合蛋白2抗體 Anti-SORBS2/ArgBP2
RecQ解旋酶樣蛋白5抗體 Anti-RECQL5
神經(jīng)細胞PAS結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 Anti-NPAS3
XAB2蛋白抗體 Anti-XAB2
STRN4蛋白抗體
Striatin 4
線粒體裂變因子MFF抗體
MFF
絲氨酸蛋白酶抑制劑B1抗體 Anti-SERPINB1
酪酪肽抗體 Anti-Peptide YY/PYY
早老素蛋白-1抗體 Anti-presenilin 1/PS-1
環(huán)指蛋白調(diào)節(jié)蛋白激酶C蛋白抗體 Anti-TRIM41
Cy3標記豚鼠IgG
兔氣管平滑肌細胞Guinea pig IgG / Cy3
G蛋白偶聯(lián)受體18抗體
C20orf48; HARP; hPANK2; HSS; MGC15053; NBIA1; PANK2; PANK2_HUMAN; Pantothenate kinase 2 (Hallervorden Spatz syndrome); Pantothenate kinase 2; Pantothenic acid kinase 2; PKAN; RP23 387C21.4.
兔氣管上皮細胞
小鼠肺動脈內(nèi)皮細胞
Snu-1人胃癌細胞
HCC1937人乳腺癌細胞