產(chǎn)品名稱(chēng)
小鼠海綿體平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
海綿體組織
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
分類(lèi)
小鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1869
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠海綿體平滑肌細(xì)胞分離自海綿體組織；海綿體，又稱(chēng)海綿體肌，是硬的平滑肌和結(jié)締組織。海綿體是一種勃起組織，外面包有堅(jiān)厚的白膜，內(nèi)部由結(jié)締組織和平滑肌組成海綿狀支架，其腔隙與血管相通。它主要包括海綿體內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞3種細(xì)胞成分。其中平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞鑲嵌于海綿體細(xì)胞外基質(zhì)的膠原中，在消化海綿體組織時(shí)，膠原酶的作用主要是松解海綿體內(nèi)皮細(xì)胞與基膜的聯(lián)系，破壞海綿體內(nèi)皮細(xì)胞間的緊密連接。因此可用膠原酶分離出海綿體平滑肌細(xì)胞。平滑肌，是非橫紋肌的肌肉組織。分布在人體動(dòng)脈和靜脈血管壁、膀胱、、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫狀肌和虹膜。平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠海綿體平滑肌細(xì)胞采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠海綿體平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
順烏頭酸酶（ACO）活性檢測(cè)試劑盒
大鼠神經(jīng)軟骨蛋白(NCDN)elisa檢測(cè)試劑盒
DMEM培養(yǎng)基
皮質(zhì)醇(Cortisol)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
組織游離氨基酸含量比色法定量檢測(cè)試劑盒
小鼠糖原磷酸化酶工酶II(GP-II)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠膠原吡啶交聯(lián)(PYD)elisa檢測(cè)試劑盒
血液磷酸二酯酶3（PDE3）活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量檢測(cè)試劑盒
人乳鐵蛋白（LTF）elisa檢測(cè)試劑盒
內(nèi)皮分化相關(guān)因子1抗體 EDF1
凝血酶(凝血因子II)激活肽2抗體 Thrombin Activation peptide fragment 2
FOXL1蛋白抗體 FOXL1
GTP酶IMAP家族成員2抗體 GIMAP2
胰島素基因增強(qiáng)結(jié)合蛋白2抗體 Islet 2
乙?；M蛋白H4抗體 Histone H4 (Acetyl K12)
多巴胺受體D4抗體 Dopamine D4 receptor
翻譯延伸因子EF-1a抗體 EEF1A1
突觸后密度蛋白93抗體 PSD93
微管蛋白δ1/δ Tubulin抗體 Delta 1 Tubulin
RSPO3蛋白抗體 RSPO3
SH3D19抗體 SH3D19
8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框80抗體 C8orf80
AF594標(biāo)記的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5抗體 STAT5, Alexa Fluor 594 conjugated
鉀離子通道蛋白家族成員1樣蛋白抗體 KCNE1L
解旋酶樣轉(zhuǎn)錄因子抗體 HLTF
組織賴(lài)羥化酶（lysyl hydroxylase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
小鼠海綿體平滑肌細(xì)胞人促甲狀腺素(TSH)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠碘甲腺原氨酸脫碘酶Ⅱ(DIO2)elisa檢測(cè)試劑盒
Adapter protein X11 alpha; Adapter protein X11alpha; Amyloid beta A4 precursor protein-binding family A member 1; Apba1; APBA1_HUMAN; Mint 1; Mint-1; Neuron specific X11 protein; Neuron-specific X11 protein; Neuronal Munc18 1 interacting protein 1; Neuronal Munc18-1-interacting protein 1; UROP11; x11; X11alpha.
小鼠頜下腺上皮細(xì)胞
兔視網(wǎng)膜前體細(xì)胞
MC38+LUC小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記
HT55人結(jié)腸癌細(xì)胞