培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠腎足細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
腎臟組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
不規(guī)則 含足突細(xì)胞
分類
大鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1590
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）細(xì)胞來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物正常腎臟組織。
2)細(xì)胞鑒定：廣譜角蛋白（PCK）或WT-1（Wilm'sTumorProtein）熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式：不規(guī)則，含足突細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf 原代腎足 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介：
腎小球?yàn)檠哼^濾器，腎小球壁構(gòu)成過濾膜。腎小球過濾膜從內(nèi)到外有三層結(jié)構(gòu)：內(nèi)層為內(nèi)皮、中層為腎小球基膜、外層為上皮細(xì)胞層，上皮細(xì)胞又稱足細(xì)胞，其不規(guī)則突起稱足突，其間有許多狹小間隙，血液經(jīng)濾膜過濾后，濾液入腎小球囊。在正常情況下，血液中絕大部分蛋白質(zhì)不能濾過而保留于血液中，僅小分子物質(zhì)如尿素、葡萄糖、電解質(zhì)及某些小分子蛋白能濾過。
腎足細(xì)胞即腎小球上皮細(xì)胞，它附著于腎小球基底膜的外側(cè)，連同腎小球基底膜和腎小球基膜一起構(gòu)成了腎小球血液濾過屏障。又由于正常成年機(jī)體的腎臟足細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞，體外培養(yǎng)的原代細(xì)
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠白細(xì)胞介素4(IL-4)elisa檢測試劑盒
山羊C反應(yīng)蛋白(CRP)elisa檢測試劑盒
植物組織膜性囊泡（vacuole）分離試劑盒
植物硝態(tài)氮測試盒 50T/48樣 比色法
大鼠糖原磷酸化酶(GP)elisa檢測試劑盒
睪丸蛋白聚糖2抗體 Anti-SPOCK2/Testican 2
復(fù)制激活因子C2抗體 Anti-RFC2
轉(zhuǎn)錄延伸因子NELF抗體 Anti-NELF
核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子YY1抗體 Anti-YY1
纖維母細(xì)胞生長因子5抗體 FGF5
線粒體前體蛋白TIMM23抗體 TIMM23
γ干擾素誘導(dǎo)蛋白IP30抗體 IFI30
白介素18抗體 IL18
BRPF3蛋白抗體 BRPF3
CD3D抗體 CD3D
離子轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白SLC7A9抗體 SLC7A9
磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體 Phospho-TORC2 (Ser171)
腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體抗體 TRAIL
軸突蛋白3抗體 NRXN3
睪丸特異性DMRT3蛋白抗體 DMRT3
骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體 BMP5
L型氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗體 LAT3
MS4A6E蛋白抗體 MS4A6E
人狀瘤病毒E6相關(guān)蛋白抗體 UBE3A
乳腺癌、胃癌抗原GA55抗體 TACC1
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)elisa分析檢測試劑盒
大鼠腎足細(xì)胞Mouse Anti-Human IgM / Cy3
FBXL3蛋白抗體
LAMA; LAMA1; Laminin A chain; Laminin subunit alpha-1; Laminin-1 subunit alpha; Laminin-3 subunit alpha; S-laminin subunit alpha; S-LAM alpha; Laminin subunit alpha-1; LAMA1_HUMAN; Laminin-1 subunit alpha; Laminin-3 subunit alpha. Laminin α-1; Laminin α1; Laminin α 1; Laminin subunit α1; Laminin subunit α-1.
大鼠腎足細(xì)胞
人直腸平滑肌細(xì)胞
LX-2+GFP人肝星形細(xì)胞+GFP
ME-180人表皮樣癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。