產(chǎn)品名稱
大鼠髓核細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
椎間盤組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
梭形或多角形細(xì)胞
分類
大鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1653
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常椎間盤組織。
2)細(xì)胞鑒定：Ⅱ型膠原(Collagen Ⅱ)熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：梭形或多角形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf 原代軟骨 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
髓核是乳白色半透明膠狀體，富于彈性，為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分，位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯(cuò)的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。髓核細(xì)胞的過(guò)早衰老與凋亡是導(dǎo)致椎間盤退行性變過(guò)程的主要原因之一，主要表現(xiàn)為退變椎間盤內(nèi)髓核細(xì)胞功能降低和數(shù)量減少，使得其 Ⅱ型膠蛋白聚糖等基質(zhì)分泌量下降，終導(dǎo)致椎間盤維持脊柱高度、承受各方應(yīng)力等生物力學(xué)功能喪失。
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠可溶性Toll樣受體9(sTLR9/sCD289)elisa檢測(cè)試劑盒
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植物總RNA純化試劑盒（低多糖/酚）
甲磺酸乙脂突變誘導(dǎo)試劑盒
DMEM無(wú)糖培養(yǎng)基 500ml
細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧（ROS）初級(jí)綠色熒光測(cè)定試劑盒
甘油激酶 EC2.7.1.30 10KU/瓶
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小鼠丙型肝炎抗體(IgG)elisa檢測(cè)試劑盒
轉(zhuǎn)錄因子SP4抗體 Transcription factor Sp4
組氨酸酸性磷酸酶結(jié)構(gòu)域蛋白2A抗體 HISPPD2A/IP6 Kinase
核帽結(jié)合蛋白2樣蛋白抗體 NCBP2L
核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子YY1抗體 YY1
NT5D1蛋白抗體 NT5D1
Pacific Blue標(biāo)記小鼠CD45.1單克隆抗體 mouse CD45.1/Pacific Blue
上皮細(xì)胞有絲分裂蛋白抗體 Epigen
神經(jīng)細(xì)胞胞漿蛋白9.5/蛋白基因產(chǎn)物9.5單克隆抗體 UCHL1/PGP9.5
DNA聚合酶ε/DNA pol ε抗體 DNA Polymerase epsilon
EFCAB1蛋白抗體 EFCAB1
磷酸化環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件調(diào)節(jié)蛋白抗體 phospho-CREM (Ser271 + Ser274)
磷酸化上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體 phospho-ECT2 (Thr373)
補(bǔ)體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白2抗體 CTRP2
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子11抗體 FGF11
小腦鋅指ZIC4蛋白抗體 ZIC4
鋅指蛋白782抗體 ZNF782
大鼠神經(jīng)介素B(NMB)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠髓核細(xì)胞Mouse Anti-Rat IgG H&L / Cy5.5
CD307c抗體
calmodulin regulated spectrin-associated protein 1; Calmodulin-regulated spectrin-associated protein 1; CAMP1_HUMAN; camsap1; PRO2405.
大鼠髓核細(xì)胞
人支氣管平滑肌細(xì)胞
neuro-2a+luc小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記
MFC小鼠前胃癌細(xì)胞