
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠嗅球神經(jīng)干細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
嗅球組織
生長特性
半貼壁半懸浮培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
集落 克隆球狀
分類
大鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1721
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1) 組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常嗅球組織。
2) 細(xì)胞鑒定:Nestin熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:集落,克隆球狀,半貼壁半懸浮培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 原代 神經(jīng)干 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
嗅球是脊椎動(dòng)物前腦結(jié)構(gòu)中參與嗅覺的部分,用于感知?dú)馕?。嗅球可分兩個(gè)不同結(jié)構(gòu):主嗅球與輔助嗅球。
神經(jīng)干細(xì)胞是存在于哺乳動(dòng)物體內(nèi)的一種具有多向分化潛能和自我更新能力的細(xì)胞,能分化為神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,其在神經(jīng)系統(tǒng)中的替代前景廣闊。
公司正在出售的產(chǎn)品:
體液亞硝酸鹽含量熒光定量檢測試劑盒
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磷酸化T細(xì)胞活化連接蛋白抗體
Phospho-LAT (Tyr191)
神經(jīng)細(xì)胞正五聚蛋白受體抗體
NPTXR
嗜鉻顆粒胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白VAT1抗體 Anti-VMAT1/VAT1
肌痙攣性癲癇病相關(guān)EPM2蛋白抗體 Anti-NHLRC1/EPM2A
G蛋白家族RAB21蛋白抗體 Anti-RAB21
跨膜蛋白超家族9-1抗體 Anti-TM9SF1
大鼠成纖維細(xì)胞生長因子13(FGF-13)elisa分析檢測試劑盒
大鼠嗅球神經(jīng)干細(xì)胞Rabbit Anti-Guinea Pig IgG H&L / Cy3
胎盤蛋白14抗體
Toll like receptor 11; Gm287; MGC129352; MGC129353; RGD1564460; TLR11_MOUSE.
大鼠嗅球神經(jīng)干細(xì)胞
人眼眶成纖維細(xì)胞
U251 MG/TMZ人類星形膠質(zhì)瘤耐替莫唑胺細(xì)胞
MLTC-1小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。