
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人CIK細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
外周血。
生長特性
懸浮培養(yǎng)
細胞形態(tài)
上皮樣
分類
人原代細胞
貨號
A01X1458
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1) 細胞來源于外周血。
2) 細胞鑒定:CD3或者CD56熒光染色為陽性。
3) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
4) 細胞生長方式:懸浮培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 原代 CIK 細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
CIK細胞,即細胞因子誘導的殺傷細胞,由于該細胞同時表達CD3+和CD56+兩種跨膜蛋白,又稱為NK細胞樣T細胞,具有T細胞的抗瘤活性和NK細胞的非MHC限制性殺瘤特點。
CIK細胞對腫瘤細胞的識別能力強,能點射腫瘤細胞,且不會傷及正常細胞。尤其對手術后或放化療后患者效果顯著,能消除殘留微小的轉移病灶,防止癌細胞擴散,提高機體力。CIK細胞被認為是新一代的腫瘤過繼細胞的方案之一。
公司正在出售的產(chǎn)品:
植物甘露糖6-磷酸異構酶(mannose-6-phosphate isomerase;MPI)電泳分析試劑盒
組織L-乳酸比色法定量檢測試劑盒
人3氧代5α類固醇4脫氫酶2(SRD5A2)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠B-細胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)elisa檢測試劑盒
小鼠密封蛋白(OCLN)elisa檢測試劑盒
肝素(heperin)纖維蛋白檢測法(Fibrometer)分析試劑盒
核黃素轉運因子2(RFT2)elisa檢測試劑盒
磷酸二酯酶5A(Phosphodiesterase 5A)
小鼠彈性蛋白酶4(ELA4)elisa檢測試劑盒
尿苷二磷酸葡萄糖脫氫酶單克隆抗體 UGDH
葡萄糖6-N-乙?;D移酶1抗體 GNPNAT1
GR6蛋白抗體 GR6
G蛋白偶聯(lián)受體179抗體 GPR179
乙?;土姿峄M蛋白H3抗體 Histone H3 (acetyl K9, phospho S10)
應激誘導分泌蛋白1抗體 SISP1
二氫嘧啶酶相關蛋白3抗體 CRMP3
芳香乙酰胺脫乙?;笜拥鞍?span>4抗體 AADACL4
外周蛋白單克隆抗體 Peripherin
無精癥缺失基因2抗體 DAZ2
Sema6A抗體 Sema6A
SUSD1蛋白抗體 SUSD1
ADP核糖磷酸水解酶9抗體 NUDT9
AF680標記的血小板內(nèi)皮細胞黏附分子1抗體 CD31, Alexa Fluor 680 conjugated
膠體金標記的β淀粉樣肽(1-42)單克隆抗體 beta-Amyloid(1-42), Co-Gold conjugated
卷曲螺旋結構域蛋白117抗體 CCDC117
小鼠穿孔素1(PRF1)elisa檢測試劑盒
人CIK細胞小鼠凝血因子Ⅷ(FⅧ)elisa分析檢測試劑盒
人CD22分子(CD22)elisa檢測試劑盒
alpha 2C Adrenergic Receptor; Adra 2c; Adra 2c; ADRA2C; ADRA2L2; ADRA2L2; ADRA2RL2; ADRA2RL2; ADRARL2; ADRARL2; Adrenergic alpha 2C receptor; Adrenoceptor alpha 2C; Alpha 2C adrenergic receptor; Alpha 2C adrenergic receptor subtype C4; Alpha 2C adrenoceptor; Alpha 2C adrenoreceptor; Alpha 2CAR; alpha2 AR C4; alpha2 AR C4; alpha2 C4; alpha2 C4; alpha2C; alpha2C; ALPHA2CAR; alpha2cii-adrenergic receptor; Subtype alpha2 C4; Subtype alpha2 C4; ADA2C_HUMAN.
人CIK細胞
人小膠質(zhì)細胞
HRMC(腎小球系膜細胞)
MRC-5人胚肺成纖維細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。